जानूस ग्रीन बी, अंग्रेजी नाम जानूस ग्रीन, आणविक सूत्र C30H31ClN6, CAS 2869-83-2, कमरे के तापमान और दबाव पर एक हरे रंग का ठोस पाउडर है। ऐसा प्रतीत होता है कि यह पानी में घुलनशील है लेकिन अल्कोहल कार्बनिक सॉल्वैंट्स में थोड़ा घुलनशील है। इसकी पानी में घुलनशीलता अधिक होती है, खासकर गर्म पानी में घुलने पर यह नीला दिखाई देता है। यह अल्कोहल सॉल्वैंट्स में भी थोड़ा घुलनशील है। यह गुण इसे जैविक नमूनों में तेजी से फैलने और दाग लगाने में सक्षम बनाता है। यह एक विशिष्ट लाइव स्टेनिंग एजेंट है जिसका उपयोग माइटोकॉन्ड्रियल लाइव स्टेनिंग, फंगल और प्रोटोजोअन स्टेनिंग, भ्रूण अनुभाग स्टेनिंग के साथ-साथ रेडॉक्स संकेतक और कॉपर इलेक्ट्रोप्लेटिंग एडिटिव्स के लिए किया जा सकता है। जैव रसायन और फ्लोरोसेंट रंगों जैसे बुनियादी अनुसंधान क्षेत्रों में इसका अच्छा अनुप्रयोग है। इसकी आणविक संरचना में एज़ो रंग होते हैं, जो इसे एक प्रभावी कार्बनिक रंग बनाता है। इसकी आणविक संरचना में सकारात्मक चार्ज इसे इलेक्ट्रोप्लेटिंग सामग्रियों में कुछ निश्चित अनुप्रयोग मूल्य भी देता है।

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रासायनिक सूत्र |
C30H31ClN6+ |
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सटीक द्रव्यमान |
510 |
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आणविक वजन |
511 |
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m/z |
510 (100.0%), 511 (32.4%), 512 (32.0%), 513 |
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मूल विश्लेषण |
सी, 70.51; एच, 6.11; एन, 16.44; सीएल, 6.94 |

जानूस ग्रीन बीएक महत्वपूर्ण जैविक डाई के रूप में, कई क्षेत्रों में इसके अनुप्रयोगों की एक विस्तृत श्रृंखला है।

1. माइटोकॉन्ड्रिया का विवो धुंधलापन
सबसे प्रसिद्ध -ज्ञात उपयोग माइटोकॉन्ड्रियल विशिष्ट लाइव स्टेनिंग एजेंट के रूप में है। माइटोकॉन्ड्रिया कोशिकाओं में "ऊर्जा कारखाने" हैं, जो सेलुलर जीवन गतिविधियों को बनाए रखने के लिए एटीपी जैसे ऊर्जा अणुओं के उत्पादन के लिए जिम्मेदार हैं। यह विशेष रूप से माइटोकॉन्ड्रिया को दाग सकता है, जिससे वे उच्च शक्ति वाले माइक्रोस्कोप के नीचे नीले{3}हरे दिखाई देते हैं, जबकि साइटोप्लाज्म लगभग रंगहीन होता है। यह धुंधलापन विशेषता शोधकर्ताओं को कोशिकाओं में माइटोकॉन्ड्रिया के वितरण, आकारिकी और मात्रा का स्पष्ट रूप से निरीक्षण करने में सक्षम बनाती है, जो माइटोकॉन्ड्रिया के कार्य, चयापचय और रोगों के साथ संबंध का अध्ययन करने के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।
2. कवक और प्रोटोजोआ का धुंधलापन
माइटोकॉन्ड्रियल धुंधलापन के अलावा, इसका उपयोग कवक और प्रोटोजोआ को धुंधला करने के लिए भी किया जा सकता है। कवक और प्रोटोजोआ जैविक और चिकित्सा अनुसंधान में महत्वपूर्ण वस्तुएं हैं, और उनकी आकृति विज्ञान, संरचना और शारीरिक विशेषताएं जीवन प्रक्रियाओं और रोग तंत्र को समझने के लिए महत्वपूर्ण हैं। इसके धुंधला गुण इन छोटे जीवों को माइक्रोस्कोप के तहत निरीक्षण करना और पहचानना आसान बनाते हैं, जिससे संबंधित अनुसंधान के लिए मजबूत समर्थन मिलता है।


3. भ्रूण अनुभाग धुंधला हो जाना
विकासात्मक जीवविज्ञान और भ्रूणविज्ञान अनुसंधान में, भ्रूण अनुभाग धुंधलापन भ्रूण के विकास और संरचनात्मक परिवर्तनों की प्रक्रिया को समझने का एक महत्वपूर्ण साधन है। इसका उपयोग भ्रूण के टुकड़ों को रंगने के लिए किया जा सकता है ताकि शोधकर्ताओं को विभिन्न विकासात्मक चरणों में भ्रूण की सेलुलर ऊतक संरचना और रूपात्मक विशेषताओं का निरीक्षण और विश्लेषण करने में मदद मिल सके। भ्रूण के विकास के नियामक तंत्र, आनुवंशिक रोगों की घटना और प्रजनन स्वास्थ्य मुद्दों को समझने के लिए यह बहुत महत्वपूर्ण है।
4. रेडॉक्स संकेतक
इसमें ऑक्सीकरण -कमी सूचक का कार्य भी है। रासायनिक प्रतिक्रियाओं में, पदार्थों के ऑक्सीकरण और कमी की स्थिति अक्सर रंग में परिवर्तन के साथ होती है। विभिन्न रेडॉक्स अवस्थाओं के तहत, यह अलग-अलग रंग प्रदर्शित करेगा और इसलिए इसे रेडॉक्स प्रतिक्रियाओं के लिए एक संकेतक के रूप में उपयोग किया जा सकता है। यह विशेषता इसे रासायनिक विश्लेषण, पर्यावरण निगरानी और खाद्य उद्योग जैसे क्षेत्रों में संभावित अनुप्रयोग मूल्य बनाती है।


4{{1}अमीनो-एन, एन-डायथाइलएनिलिन या पी{4}}फेनिलेनिडामाइन (एन, एन-डायथाइलएनिलिन युक्त) से शुरू करके, मेथिलीन वायलेट 3आरएएक्स एक ऑक्सीडेंट की उपस्थिति में एनिलिन के साथ चक्रीकरण द्वारा प्राप्त किया जाता है। बाद में,जानूस ग्रीन बीडायज़ोटाइजेशन और युग्मन प्रतिक्रिया द्वारा तैयार किया जाता है।
आरंभिक सामग्री: मान लें कि हम मुख्य आरंभिक सामग्री के रूप में 4-अमीनो-एन, एन-डायथाइलएनिलिन का उपयोग करते हैं। पी-फेनिलेनेडायमाइन (एन, एन-डायथाइलएनिलिन युक्त) के मामले में वांछित एन, एन{7}}डायथाइलप्रतिस्थापित पी-फेनिलेनेडियमाइन को अलग करने या संश्लेषित करने के लिए अतिरिक्त कदमों की आवश्यकता हो सकती है, लेकिन यहां हम एकल प्रारंभिक सामग्री के मामले पर ध्यान केंद्रित करते हैं।
उद्देश्य: मिथाइलीन वायलेट 3RAX के समान एक बेंजोहेटेरोसायक्लिक संरचना बनाने के लिए 4 {{1} अमीनो {{2} N, N {{6} डायथाइलएनिलिन को एनिलिन या अन्य उपयुक्त यौगिकों के साथ चक्रित करना। सबसे पहले, 4-एमिनो-एन, एन-डायथाइलएनिलिन को कुछ माध्यमों जैसे एसाइलेशन, संघनन आदि के माध्यम से अधिक आसानी से चक्रीय मध्यवर्ती में परिवर्तित किया जाता है, और फिर मध्यवर्ती को एनिलिन के साथ चक्रित किया जाता है।
उदाहरण प्रतिक्रिया (प्रत्यक्ष नहीं, केवल चित्रण के लिए):
एसाइलेशन प्रतिक्रिया (एमाइड इंटरमीडिएट का गठन): 4 {{1} अमीनो - एन, एन-डायथाइलानिलिन एसाइल क्लोराइड या एनहाइड्राइड के साथ प्रतिक्रिया करके संबंधित एमाइड का उत्पादन करता है।
4-अमीनो-एन, एन-डायथाइलानिलिन+एसिल क्लोराइड → एमाइड इंटरमीडिएट+एचसीएल
रिंग रिएक्शन (परिकल्पना): एमाइड इंटरमीडिएट को उत्प्रेरक और/या हीटिंग स्थितियों के तहत एनिलिन के साथ चक्रित किया जाता है।
एमाइड इंटरमीडिएट+एनिलिन → इंटरमीडिएट मिथाइलीन वायलेट 3RAX के समान
उद्देश्य: यह सुनिश्चित करना कि मध्यवर्ती में बाद की डायज़ोटाइज़ेशन प्रतिक्रियाओं के लिए सुगंधित प्राथमिक एमाइन शामिल हैं।
उदाहरण प्रतिक्रिया (यदि मध्यवर्ती पहले से ही एक सुगंधित प्राथमिक अमीन है, तो इस चरण को छोड़ दें):
यदि मध्यवर्ती एक सुगंधित प्राथमिक अमीन नहीं है, तो इसे कमी, हाइड्रोलिसिस या अन्य प्रतिक्रियाओं के माध्यम से एक सुगंधित प्राथमिक अमीन में परिवर्तित करने की आवश्यकता हो सकती है।
गैर प्राथमिक अमीन मध्यवर्ती+अपचायक/हाइड्रोलाइजिंग एजेंट → सुगंधित प्राथमिक अमीन मध्यवर्ती
उद्देश्य: सुगंधित प्राथमिक अमीन मध्यवर्ती को डायज़ोनियम लवण में परिवर्तित करना।
रासायनिक समीकरण:
ऐरोमैटिक प्राइमरी एमाइन इंटरमीडिएट+नाइट्रस एसिड+एसिड → डायज़ोनियम नमक+पानी
ध्यान दें: डायज़ोनियम लवण के अपघटन को रोकने के लिए डायज़ोटाइजेशन प्रतिक्रिया आमतौर पर कम तापमान (जैसे 0 डिग्री सेल्सियस से नीचे) और अम्लीय परिस्थितियों में की जाती है।
उद्देश्य: जियाना ग्रीन बी बनाने के लिए उपयुक्त फेनोलिक या सुगंधित अमाइन यौगिकों के साथ डायज़ोनियम लवण को जोड़ना।
रासायनिक समीकरण (उदाहरण): डायज़ोनियम लवण+फेनोलिक या सुगंधित अमाइन यौगिक → C30H31ClN6+द्वारा-उत्पाद
ध्यान दें: युग्मन उत्पादों के निर्माण को बढ़ावा देने के लिए युग्मन प्रतिक्रियाएं आमतौर पर क्षारीय परिस्थितियों में की जाती हैं। लक्ष्य उत्पाद, जियाना ग्रीन बी प्राप्त करने के लिए उपयुक्त फेनोलिक या सुगंधित अमाइन यौगिकों का चयन करना महत्वपूर्ण है।
अतिरिक्त चरण: शुद्धिकरण और पश्च प्रसंस्करण
उद्देश्य: जियाना ग्रीन बी को प्रतिक्रिया मिश्रण से अलग और शुद्ध करना।
विधि: इसमें विलायक निष्कर्षण, क्रिस्टलीकरण, पुन: क्रिस्टलीकरण, क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण (जैसे स्तंभ क्रोमैटोग्राफी, पतली परत क्रोमैटोग्राफी, एचपीएलसी, आदि) जैसी तकनीकें शामिल हो सकती हैं।
ध्यान दें: उच्च शुद्धता वाले लक्ष्य उत्पाद प्राप्त करने के लिए शुद्धिकरण और प्रसंस्करण के बाद के चरण महत्वपूर्ण हैं। प्रयोगशाला में, उपज और शुद्धता को अनुकूलित करने के लिए इन चरणों को कई बार दोहराने की आवश्यकता हो सकती है।
जैविक प्रयोगों में,जानूस ग्रीन बीमाइटोकॉन्ड्रिया की आकृति विज्ञान और वितरण का निरीक्षण करने के लिए आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले लाइव स्टेनिंग एजेंट के रूप में इसका व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। इसकी अनूठी धुंधला विशेषताएं माइटोकॉन्ड्रिया को माइक्रोस्कोप के तहत स्पष्ट रूप से अलग करने में सक्षम बनाती हैं, जिससे यह कोशिका जीव विज्ञान अनुसंधान में एक महत्वपूर्ण उपकरण बन जाता है। निम्नलिखित विस्तार से बताएगा कि जियाना ग्रीन बी डाई समाधान का 1% गुणवत्ता अंश कैसे तैयार किया जाए। इस प्रक्रिया में न केवल रासायनिक अभिकर्मकों का सटीक वजन और विघटन शामिल है, बल्कि यह सुनिश्चित करने के लिए तापमान और विलायक चयन जैसे कारकों पर सावधानीपूर्वक विचार भी शामिल है कि अंतिम डाई समाधान स्थिर और प्रभावी दोनों है।
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प्रायोगिक तैयारी
सामग्री और अभिकर्मक
जियाना ग्रीन बी पाउडर: सुनिश्चित करें कि खरीदी गई जियाना ग्रीन बी उच्च शुद्धता और अशुद्धियों से मुक्त है, जो उच्च गुणवत्ता वाले डाई समाधान तैयार करने का आधार है।
फिजियोलॉजिकल सेलाइन: फिजियोलॉजिकल सेलाइन, जिसे 0.9% सोडियम क्लोराइड समाधान के रूप में भी जाना जाता है, का उपयोग अक्सर जैविक प्रयोगों में कोशिकाओं को होने वाले नुकसान को कम करने के लिए विलायक के रूप में किया जाता है क्योंकि इसका आसमाटिक दबाव मानव कोशिकाओं के समान होता है। इस प्रयोग में, जियाना ग्रीन बी के लिए विघटन माध्यम के रूप में शारीरिक खारा का उपयोग किया गया था।
मापने वाला सिलेंडर: शारीरिक खारा समाधान को सटीक रूप से मापने के लिए उपयोग किया जाता है।
बीकर: जियाना ग्रीन बी पाउडर को घोलने के लिए उपयोग किया जाता है।
चुंबकीय स्टिरर (वैकल्पिक): विघटन प्रक्रिया को तेज करने और यह सुनिश्चित करने के लिए उपयोग किया जाता है कि पाउडर विलायक में समान रूप से फैला हुआ है।
तापमान गेज: विघटन प्रक्रिया के दौरान तापमान की निगरानी और नियंत्रण के लिए उपयोग किया जाता है।
इलेक्ट्रॉनिक संतुलन: जियाना ग्रीन बी पाउडर के सटीक वजन के लिए उपयोग किया जाता है।
वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क (वैकल्पिक): यदि उच्च परिशुद्धता वांछित है, तो वॉल्यूम निर्धारण के लिए वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क का उपयोग किया जा सकता है। लेकिन इस सरल तैयारी विधि में, एक बीकर और एक मापने वाले सिलेंडर का सीधे उपयोग किया जा सकता है।
भूरी कांच की बोतल: तैयार जियाना ग्रीन बी डाई घोल को स्टोर करने के लिए उपयोग किया जाता है। भूरे रंग की बोतल डाई के घोल पर प्रकाश के प्रभाव को रोक सकती है और इसकी स्थिरता बनाए रख सकती है।
सुरक्षा संरक्षण
लैब कोट पहनें: कपड़ों को रासायनिक संदूषण से बचाएं।
दस्ताने पहनें: रासायनिक अभिकर्मकों के साथ त्वचा के सीधे संपर्क को रोकें।
चश्मा पहनें: आंखों में घोल के छींटे पड़ने से रोकने के लिए।
धूआं हुड में संचालन: प्रयोगशाला में वायु परिसंचरण सुनिश्चित करें और हानिकारक गैसों के संचय को कम करें।
तैयारी के चरण
इलेक्ट्रॉनिक तराजू का उपयोग करके 0.5 ग्राम जियाना ग्रीन बी पाउडर का सटीक वजन करें। ध्यान दें कि सटीक वजन सुनिश्चित करने के लिए वजन करने से पहले तराजू को कैलिब्रेट किया जाना चाहिए।
पाउडर को उड़ने से रोकने के लिए तौले हुए जियाना ग्रीन बी पाउडर को एक साफ बीकर में सावधानी से डालें।
एक स्नातक सिलेंडर का उपयोग करके 50 एमएल शारीरिक खारा को सटीक रूप से मापें। ध्यान दें कि मापते समय, सटीक माप सुनिश्चित करने के लिए मापने वाले सिलेंडर को तरल स्तर के निम्नतम बिंदु के साथ दृष्टि स्तर की रेखा के साथ एक स्थिर सतह पर रखा जाना चाहिए।
जियाना ग्रीन बी पाउडर वाले बीकर में धीरे-धीरे मापी गई फिजियोलॉजिकल सेलाइन डालें। ध्यान दें कि इसे बीकर की दीवार पर धीरे-धीरे डाला जाना चाहिए ताकि तरल के छींटे पड़ने या बहुत अधिक झाग पैदा होने से बचा जा सके।
जियाना ग्रीन बी पाउडर को घोलने में मदद के लिए घोल को कांच की छड़ से धीरे से हिलाएं। यदि स्थितियाँ अनुमति देती हैं, तो विघटन दक्षता में सुधार के लिए सरगर्मी के लिए एक चुंबकीय स्टिरर का उपयोग किया जा सकता है।
हिलाने की प्रक्रिया के दौरान, घोल के रंग परिवर्तन पर ध्यान दें। जैसे ही जियाना ग्रीन बी घुलता है, घोल धीरे-धीरे गहरे हरे या नीले-हरे रंग में बदल जाना चाहिए।
कमरे के तापमान पर जियाना ग्रीन बी की सीमित घुलनशीलता के कारण, विघटन दक्षता में सुधार के लिए, बीकर को पानी के स्नान में 30-40 डिग्री सेल्सियस तक गर्म किया जा सकता है। ध्यान दें कि जियाना ग्रीन बी की रासायनिक संरचना को नुकसान पहुंचाने या अत्यधिक विलायक वाष्पीकरण से बचने के लिए हीटिंग के दौरान तापमान बहुत अधिक नहीं होना चाहिए।
गर्म करने की प्रक्रिया के दौरान, घोल को तब तक हिलाते रहें जब तक कि जियाना ग्रीन बी पाउडर पूरी तरह से घुल न जाए और घोल एक समान और पारदर्शी न हो जाए।
घोलने के बाद घोल के रंग और पारदर्शिता की जांच करें। यदि घोल में अघुलनशील कण या असमान रंग हैं, तो समस्या का समाधान होने तक हिलाते रहना या उचित तापन जारी रखना चाहिए।
यदि समाधान की सांद्रता को समायोजित करना आवश्यक है, तो वास्तविक स्थिति के अनुसार शारीरिक खारा या जियाना ग्रीन बी पाउडर की मात्रा को उचित रूप से बढ़ाया या घटाया जा सकता है। लेकिन इस तैयारी विधि में, हमने अभिकर्मक को 1% के द्रव्यमान अंश के अनुसार सटीक रूप से तौला है, इसलिए आमतौर पर किसी अतिरिक्त समायोजन की आवश्यकता नहीं होती है।
तैयार जियाना ग्रीन बी डाई घोल को भूरे रंग की कांच की बोतल में डालें और संदूषण और अस्थिरता को रोकने के लिए इसे कसकर बंद कर दें।
भविष्य में उपयोग और प्रबंधन के लिए बोतल पर डाई समाधान के नाम, एकाग्रता, तैयारी की तारीख और उपयोगकर्ता के नाम का लेबल लगाएं।
सावधानियां
सटीक वजन:
स्वास्थ्यवर्धक ग्रीन बी पाउडर और शारीरिक खारा की सटीक माप सुनिश्चित करना उच्च गुणवत्ता वाले डाई समाधान तैयार करने की कुंजी है।
01
तापमान नियंत्रण:
हीटिंग प्रक्रिया के दौरान, अत्यधिक उच्च या निम्न तापमान के कारण डाई समाधान की गुणवत्ता पर प्रतिकूल प्रभाव से बचने के लिए तापमान को सख्ती से नियंत्रित किया जाना चाहिए।
02
पर्याप्त हलचल:
हिलाना यह सुनिश्चित करने में एक महत्वपूर्ण कदम है कि हरा बी पाउडर शारीरिक खारा में समान रूप से घुल गया है, और इसे तब तक जारी रखा जाना चाहिए जब तक कि घोल एक समान और पारदर्शी न हो जाए।
03
सुरक्षित संचालन:
व्यक्तिगत सुरक्षा और प्रायोगिक वातावरण की सुरक्षा सुनिश्चित करने के लिए पूरी तैयारी प्रक्रिया के दौरान प्रयोगशाला सुरक्षा नियमों का सख्ती से पालन करें।
04
समय पर उपयोग:
तैयार डाई घोल के लंबे समय तक भंडारण से इसके रंगाई प्रभाव में कमी या अन्य रासायनिक परिवर्तन हो सकते हैं। सर्वोत्तम धुंधला प्रभाव सुनिश्चित करने के लिए तैयारी के बाद जितनी जल्दी हो सके इसका उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है।
05
अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न
1. जानूस ग्रीन बी क्या है?
जेनस ग्रीन बी एक कृत्रिम रूप से संश्लेषित बुनियादी फेनाज़ीन आधारित डाई है, जिसका उपयोग आमतौर पर जैविक धुंधलापन (जैसे माइटोकॉन्ड्रिया का जीवित धुंधलापन) और ऑक्सीकरण कमी संकेतक के रूप में किया जाता है।
2. मुख्य उद्देश्य क्या हैं?
मुख्य रूप से जैविक प्रयोगों में उपयोग किया जाता है:
- माइटोकॉन्ड्रिया का जीवित धुंधलापन (क्योंकि माइटोकॉन्ड्रिया की आंतरिक झिल्ली प्रणाली इसे रंगहीन अवस्था में बहाल कर सकती है, जिससे इसकी रेडॉक्स गतिविधि का पता चलता है)।
- सेलुलर श्वसन का पता लगाना (ऑक्सीकरण में कमी के सूचक के रूप में, नीला रंग ऑक्सीकृत अवस्था को दर्शाता है, और रंगहीन कम अवस्था को दर्शाता है)।
- इसका उपयोग उद्योग में रेशम और चमड़े के लिए डाई के रूप में भी किया जा सकता है।
3. धुंधलापन का सिद्धांत क्या है?
माइटोकॉन्ड्रिया में, जेनस ग्रीन बी माइटोकॉन्ड्रिया के अंदर आंतरिक झिल्ली (जैसे साइटोक्रोम सी ऑक्सीडेज) पर एंजाइमों द्वारा एक रंगहीन उत्पाद में बदल जाता है; माइटोकॉन्ड्रिया छोड़ने के बाद, यह ऑक्सीजन द्वारा नीले रंग में पुनः ऑक्सीकृत हो जाता है। यह प्रतिवर्ती रेडॉक्स प्रतिक्रिया इसे विशेष रूप से माइटोकॉन्ड्रियल गतिविधि को इंगित करने में सक्षम बनाती है।
4. उपयोग करते समय क्या ध्यान देना चाहिए?
- अत्यधिक धुंधलापन से बचने के लिए, जो कोशिका गतिविधि में हस्तक्षेप कर सकता है, डाई की सघनता और समय को नियंत्रित करने की आवश्यकता है (आमतौर पर 0.01%-0.02%)।
- कुछ प्रकार की कोशिकाओं के लिए, धुंधलापन प्रभाव संतोषजनक नहीं हो सकता है। स्थितियों को अनुकूलित करने की आवश्यकता है।
- अपघटन को रोकने के लिए एक अंधेरे और सीलबंद कंटेनर में स्टोर करें।
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