क्लोरोग्लुसीनॉल पाउडरC6H6O3 के रासायनिक सूत्र के साथ एक कार्बनिक यौगिक है। सफेद से पीले क्रिस्टलीय पाउडर। यह एक महत्वपूर्ण ठीक रासायनिक उत्पाद है। यह मुख्य रूप से दवा संश्लेषण के लिए मध्यवर्ती के रूप में उपयोग किया जाता है, जैसे फ्लेवोनोइड्स। कार्डियोवैस्कुलर और सेरेब्रोवास्कुलर बीमारियों के इलाज के लिए एक दवा के रूप में, फ्लेवोनोइड्स को फार्मासिस्टों द्वारा अधिक से अधिक ध्यान दिया गया है। यह आमतौर पर सुरमा, आर्सेनिक, सेरियम, क्रोमेट, क्रोमियम, सोना, लोहा, पारा, नाइट्राइट, ऑस्मियम, पैलेडियम, टिन, वैनेडियम, वैनिलिन, लिग्निन, आदि के निर्धारण के लिए और फुरफुरल, पेंटोस के निर्धारण के लिए उपयोग किया जाता है। पेंटोसन, मेथनॉल, क्लोरल हाइड्रेट, तारपीन, लिग्निफाइड सेल टिश्यू और गैस्ट्रिक जूस में हाइड्रोक्लोरिक एसिड, और हड्डी के नमूनों का डीक्लेसीफिकेशन।
रासायनिक सूत्र | C6H6O3 |
सटीक मास | 126 |
आणविक वजन | 126 |
m/z | 126 (100.0 प्रतिशत), 127 (6.5 प्रतिशत) |
मूल विश्लेषण | C, 57.14; H, 4.80; O, 38.06 |
[उद्देश्य 1]
सुरमा, आर्सेनिक, सेरियम, क्रोमेट, क्रोमियम, सोना, लोहा, पारा, नाइट्राइट, ऑस्मियम, पैलेडियम, टिन, वैनेडियम, वैनिलिन, लिग्निन, आदि का निर्धारण। फुरफुरल, पेंटोस, पेंटोसन, मेथनॉल, क्लोरल हाइड्रेट, तारपीन, हाइड्रोक्लोरिक का निर्धारण लिग्निफाइड सेल टिश्यू और गैस्ट्रिक जूस में एसिड, हड्डी के नमूनों का डीक्लेसीफिकेशन।
[उद्देश्य 2]
108-73-6 (फ्लोरोग्लुसीनोल) फ्लेवोनोइड्स के संश्लेषण के लिए एक मध्यवर्ती है, और इसे डाई उत्प्रेरक, सिंथेटिक रबर स्टेबलाइज़र, एज़ो कम्पोजिट इंक, आदि के लिए कच्चे माल के रूप में भी इस्तेमाल किया जा सकता है। बफ्लोमेडिल हाइड्रोक्लोराइड का एक मध्यवर्ती, एक वासोडिलेटर।
[उद्देश्य 3]
Phloroglucinol (108-73-6) एक महत्वपूर्ण दवा मध्यवर्ती और सामान्य रासायनिक अभिकर्मक है। यह व्यापक रूप से स्वास्थ्य उत्पादों, डाई स्टेबलाइजर और कपड़े और चमड़े के लिए जंग रोधी एजेंट, सिल्वर आयोडाइड को बदलने के लिए कृत्रिम बारिश और प्लास्टिक कैप्सूल के उत्पादन के लिए कच्चे माल के संश्लेषण में उपयोग किया जाता है। इसके अलावा, राल के इलाज और वल्केनाइजेशन, डायज़ो कॉपी सामग्री, फोटोसेंसिटिव कॉपी पेपर और फोटोग्राफिक दवाओं में इसके कई उपयोग हैं।
[उद्देश्य 4]
सुरमा, आर्सेनिक, सेरियम, क्रोमेट, क्रोमियम, सोना, लोहा, पारा, नाइट्राइट, ऑस्मियम, पैलेडियम, टिन, वैनेडियम, वैनिलिन और लिग्निन का निर्धारण। पेंटोज, एल्डिहाइड, लिग्निन, हाइड्रोक्लोरिक एसिड, मेथनॉल, क्लोरल हाइड्रेट, तारपीन का तेल, लिग्नीफाइड सेल टिश्यू और गैस्ट्रिक जूस में फ्री एसिड (हाइड्रोक्लोरिक एसिड) का निर्धारण। हड्डी के नमूनों का अपघटन।
[उद्देश्य 5]
सुरमा, आर्सेनिक, सेरियम, क्रोमेट, क्रोमियम, सोना, लोहा, पारा, नाइट्राइट, ऑस्मियम, पैलेडियम, टिन, वैनेडियम, वैनिलिन और लिग्निन का निर्धारण। पेंटोज, एल्डिहाइड, लिग्निन, हाइड्रोक्लोरिक एसिड, मेथनॉल, क्लोरल हाइड्रेट, तारपीन का तेल, लिग्नीफाइड सेल टिश्यू और गैस्ट्रिक जूस में फ्री एसिड (हाइड्रोक्लोरिक एसिड) का निर्धारण। हड्डी के नमूनों का अपघटन। ICP-AES, AAS, AFS, ICP-MS, आयन क्रोमैटोग्राफी, आदि के लिए उपयोग किया जाता है। टाइट्रिमेट्रिक विश्लेषण के लिए मानक समाधान।
कृत्रिमक्लोरोग्लुसीनोल पाउडर:
1. ब्रोमिनेशन प्रतिक्रिया:
कच्चे माल के रूप में रेसोरिसिनॉल के साथ, रेसोरिसिनॉल को पहले प्रतिक्रिया पोत में जोड़ा जाता है, और फिर क्लोरोफॉर्म को घोलने के लिए जोड़ा जाता है। विघटन के बाद, N-bromosuccinimide को क्लोरोफॉर्म में घोलकर प्राप्त किया गया N-bromosuccinimide घोल प्रतिक्रिया पोत में गिरा दिया जाता है। N-bromosuccinimide घोल का गिरने का समय 3 0 मिनट है, और तापमान गिरने के बाद 60 डिग्री तक बढ़ जाता है। प्रतिक्रिया इस तापमान पर 1 घंटे के लिए आयोजित की जाती है, और प्रतिक्रिया के बाद प्रतिक्रिया समाधान प्राप्त होता है। प्राप्त प्रतिक्रिया समाधान क्लोरोफॉर्म से सामान्य दबाव में आसवित होता है, क्लोरोफॉर्म को आसवित करने के बाद, प्राप्त तरल को कम दबाव में आसुत किया जाता है, और 150 ~ 160 डिग्री अंश को 0.098 एमपीए के वैक्यूम के तहत एकत्र किया जाता है, और अंश को सामान्य तापमान तक ठंडा किया जाता है 4-ब्रोमरेसोरसिनॉल प्राप्त करने के लिए;
रेसोरिसिनॉल और क्लोरोफॉर्म के बीच जोड़ी गई मात्रा का अनुपात 2 एमएल क्लोरोफॉर्म है जो रेसोरिसिनॉल के प्रति ग्राम जोड़ा जाता है, एन-ब्रोमोसुकिनिमाइड और क्लोरोफॉर्म के बीच जोड़ी गई राशि का अनुपात 0 है। क्लोरोफॉर्म का 9 एमएल एन-ग्राम के प्रति ग्राम जोड़ा जाता है। ब्रोमोसुकिनिमाइड, और रेसोरिसिनॉल और एन-ब्रोमोसुकिनिमाइड के बीच द्रव्यमान अनुपात 1:1.7 है;
2. हाइड्रोलिसिस प्रतिक्रिया:
चरण a में प्राप्त 4-ब्रोमरेसोरसिनॉल को प्रतिक्रिया पोत में जोड़ें, फिर ज़ाइलीन, पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड और उत्प्रेरक कॉपर, और रिफ्लक्स प्रतिक्रिया को 140 डिग्री पर 6 घंटे के लिए जोड़ें; प्रतिक्रिया के बाद, प्रतिक्रिया उत्पादों को 60 डिग्री से नीचे ठंडा किया जाता है, और कमरे के तापमान को हलचल और ठंडा करने के लिए पानी जोड़ा जाता है। इसे हटाने के लिए उत्प्रेरक कॉपर को छान लिया जाता है। फ़िल्टर किए गए प्रतिक्रिया समाधान को लेयरिंग के लिए खड़ा छोड़ दिया जाता है, और फिर क्लोरोग्लुसीनोल पोटेशियम नमक समाधान प्राप्त करने के लिए जलीय चरण लिया जाता है;
4-ब्रोम्रेसोरसिनॉल और ज़ाइलीन के बीच की अतिरिक्त मात्रा 4-ब्रोमेरेसोरसिनॉल के प्रति ग्राम ज़ाइलीन की 1.35mL है, 4-ब्रोम्रेसोरसिनॉल और पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड के बीच द्रव्यमान अनुपात 1:1.06 है, और द्रव्यमान अनुपात के बीच 4-ब्रोमरेसोरसीनोल और उत्प्रेरक कॉपर 21:1 है;
3. अम्लीकरण प्रतिक्रिया:
प्रतिक्रिया पोत में चरण बी में प्राप्त पोटेशियम फ्लोरोग्लुसीनॉल समाधान जोड़ें, इसके पीएच मान को 0.6mol/L की एकाग्रता के साथ हाइड्रोक्लोरिक एसिड के साथ 1 ~ 3 तक समायोजित करें, सरगर्मी की स्थिति के तहत, और इस स्थिति के तहत ठोस अवक्षेपित करें . ठोस अवक्षेपण के बाद, ठोस फ्लोरोग्लुसीनोल प्राप्त करने के लिए इसे छान लें कच्चा उत्पाद;
4. कच्चे उत्पाद की शुद्धि:
कच्चा डालेंक्लोरोग्लुसीनोल पाउडरएक प्रतिक्रिया पोत में चरण सी में प्राप्त उत्पाद, और पूर्ण विघटन के लिए इसे 90 ~ 100 डिग्री तक गर्म करने के लिए पानी जोड़ें। अतिरिक्त पानी की मात्रा कच्चे फ्लोरोग्लुसीनोल उत्पाद के द्रव्यमान का 4 गुना है। विघटन के बाद, 30 मिनट के लिए बैकफ्लो डीकलराइजेशन के लिए सक्रिय कार्बन जोड़ें। अतिरिक्त सक्रिय कार्बन की मात्रा क्रूड फ्लोरोग्लुसीनॉल उत्पाद के द्रव्यमान का 3.6 प्रतिशत है। रंग हटाने के बाद, 90 ~ 100 डिग्री पर थर्मल निस्पंदन करें। प्राप्त छनना स्वाभाविक रूप से ठंडा और क्रिस्टलीकृत होता है। क्रिस्टलीकरण के बाद, फ़िल्टर, प्राप्त उत्पाद को शुद्ध पानी से धोया जाता है और धोने के बाद सुखाया जाता है। सुखाने का तापमान 50 डिग्री है और सुखाने का समय 5h है। सुखाने के बाद, क्लोरोग्लुसीनॉल प्राप्त होता है। उत्पाद की शुद्धता 99.9 प्रतिशत है, और उपज 73.2 प्रतिशत है।
5. क्लोरोग्लुसीनॉल के जैव-उत्प्रेरक संश्लेषण की विधि और चरण इस प्रकार हैं:
(1) फ्लोरोग्लुसीनॉल की स्क्रीनिंग प्रतिरोधी म्यूटेंट
सेल को एक निश्चित सांद्रता तक पतला करें, फिर बैक्टीरिया का घोल लें और इसे NaNO2 घोल और HAC-NaAC बफर घोल के मिश्रित घोल में मिलाएँ, और लगभग 37 डिग्री पर पानी के स्नान में हिलाकर इसे कल्चर करें। उन्हें क्रमशः Na2HPO4 बफर समाधान में जोड़ें, उन्हें अच्छी तरह मिलाएं, उन्हें LiCl युक्त प्लेट पर फैलाएं, और उन्हें लगभग 37 डिग्री पर अंधेरे में खेती करें।
(2) phlD1 जीन की क्लोनिंग और पुनः संयोजक तनाव प्राप्त करना
बैक्टीरिया स्यूडोमोनास फ्लोरेसेंस पीएफ -5 का जीनोमिक डीएनए निकाला गया था, और पीसीआर प्रवर्धन द्वारा पॉलीकेटोन सिंथेज़ जीन (पीएचएलडी) प्राप्त किया गया था; उत्परिवर्ती जीन phlD1 साइट निर्देशित उत्परिवर्तन द्वारा प्राप्त किया गया था। लक्ष्य का टुकड़ा जेल रिकवरी किट द्वारा बरामद किया गया था। लक्ष्य के टुकड़े को संबंधित प्रतिबंध एंजाइम द्वारा 37 डिग्री 3-4 घंटों के लिए पचाया गया था। लक्ष्य टुकड़ा इथेनॉल वर्षा से शुद्ध किया गया था; प्रोकैरियोटिक एक्सप्रेशन वेक्टर pET-30a (प्लस) को उसी प्रतिबंध एंजाइम के साथ पचाया गया था, और रिकवरी और शुद्धिकरण के लिए जेल रिकवरी किट का उपयोग किया गया था; प्रोकैरियोटिक अभिव्यक्ति वेक्टर pET-phlD1 का निर्माण तब किया गया था जब वेक्टर का बहिर्जात अंश से अनुपात 1:3-10 था, और यह लगभग 16 डिग्री पर रात भर जुड़ा था; निर्मित पुनः संयोजक प्लास्मिड को एंटी फ्लोरोग्लुसीनॉल में बदल दिया गया था Escherichia कोलाई 42 डिग्री पर हीट शॉक द्वारा, और सकारात्मक पुनः संयोजक तनाव एंजाइम पाचन पहचान, पीसीआर पहचान और अनुक्रमण स्क्रीनिंग के माध्यम से प्राप्त किया गया था; - तनाव को लगभग 80 डिग्री पर संग्रहित किया गया था।
(3) इंजीनियर एस्चेरिचिया कोलाई की प्रेरित अभिव्यक्ति
एलबी तरल संस्कृति माध्यम में इंजीनियर बैक्टीरिया को टीका लगाएं (30-50 सहित)μG·mL {{0}} kanamycin), जब OD600 लगभग 0.4-0.6 37 डिग्री पर होता है, तो इंड्यूसर IPTG को बैक्टीरिया के घोल में जोड़ा जाता है, और फिर लक्ष्य प्रोटीन को प्रेरित किया जाता है 37 डिग्री पर 3 - 5 घंटे के लिए व्यक्त करने के लिए; प्रेरित संस्कृति समाधान निकालें, तलछट लें और इसे फॉस्फेट बफर से धो लें, और फिर इस बफर के साथ कोशिकाओं को 1:10 (w/v) के अनुपात में निलंबित करें। 2 × एसडीएस-पेज लोडिंग बफर, उबलते, एसडीएस-पेज वैद्युतकणसंचलन पहचान जोड़ें, इसी संलयन प्रोटीन बैंड का पता लगाया जा सकता है।
(4) फ्लोरोग्लुसीनॉल का किण्वन किण्वन माध्यम तैयार करें, स्टरलाइज़ करें और ठंडा होने पर सड़न रोकनेवाला इनोक्यूलेशन करें। ऑर्थोगोनल प्रयोग के अनुकूलन परिणामों के अनुसार, प्रारंभिक संस्कृति माध्यम, तापमान इलेक्ट्रोड और पीएच इलेक्ट्रोड को शामिल करने के माध्यम से, किण्वन तरल के तापमान और पीएच को स्वचालित रूप से समायोजित करता है, और किण्वन संस्कृति को हिलाता है।
(5) फ्लोरोग्लुसीनॉल का निष्कर्षण
आइसोफ्लोरोग्लुसीनॉल किण्वन सतह पर तैरनेवाला से एथिल एसीटेट द्वारा निकाला गया था, फिर एथिल एसीटेट को पुनर्प्राप्त किया गया था और फ्लोरोग्लुसीनोल प्राप्त करने के लिए कम दबाव में केंद्रित किया गया था।
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