सेफैडेक्स एलएच-20 सीएएस 9041-37-6

स्वरूप एवं संरचना:
सेफैडेक्स जेल एक त्रि-आयामी नेटवर्क संरचना वाला एक मनके जेल है। यह संरचना डेक्सट्रान जेल को पानी और इलेक्ट्रोलाइट समाधान में पूरी तरह से फूलने की अनुमति देती है, जिससे एक स्थिर जेल परत बनती है। डेक्सट्रान जेल की ग्रैन्युलैरिटी भी अलग है। अल्ट्राफाइन डेक्सट्रान जेल का उपयोग कॉलम क्रोमैटोग्राफी और पतली परत क्रोमैटोग्राफी के लिए किया जाता है, जिसमें बहुत उच्च रिज़ॉल्यूशन की आवश्यकता होती है, जबकि मोटे और मध्यम जेल का उपयोग प्रारंभिक क्रोमैटोग्राफी के लिए किया जाता है, जो कम दबाव में उच्च प्रवाह दर प्राप्त कर सकता है।

सूजन क्षमता:
डेक्सट्रान जेल में बड़ी संख्या में हाइड्रॉक्सिल समूह होते हैं, जो जेल को पानी और इलेक्ट्रोलाइट समाधान में पूरी तरह से फूलने में सक्षम बनाते हैं। सूजन की डिग्री डेक्सट्रान जेल की एक महत्वपूर्ण भौतिक संपत्ति है, जो जेल के पृथक्करण प्रभाव और क्रोमैटोग्राफिक कॉलम की पैकिंग घनत्व को निर्धारित करती है। जी-प्रकार के डेक्सट्रान जेल में अलग-अलग क्रॉसलिंकिंग डिग्री होती हैं, इसलिए उनकी सूजन की डिग्री और पृथक्करण सीमाएँ अलग-अलग होती हैं। सूजन की डिग्री मूल रूप से नमक और डिटर्जेंट की उपस्थिति से प्रभावित नहीं होती है, जो डेक्सट्रान जेल को विभिन्न प्रयोगात्मक स्थितियों के तहत एक स्थिर पृथक्करण प्रभाव बनाए रखने में सक्षम बनाती है।

स्थिरता:

कण आकार और पृथक्करण सीमा:
डेक्सट्रान जेल की ग्रैन्युलैरिटी का इसके पृथक्करण प्रभाव पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। विभिन्न कण आकार वाले जेल विभिन्न पृथक्करण आवश्यकताओं के लिए उपयुक्त हैं। अल्ट्रा फाइन डेक्सट्रान जेल कॉलम क्रोमैटोग्राफी और पतली परत क्रोमैटोग्राफी के लिए उपयुक्त है, जिसमें बहुत उच्च रिज़ॉल्यूशन की आवश्यकता होती है, जबकि मोटे और मध्यम जेल प्रारंभिक क्रोमैटोग्राफी के लिए उपयुक्त है। इसके अलावा, डेक्सट्रान जेल की पृथक्करण सीमा भी इसकी क्रॉसलिंकिंग डिग्री के साथ भिन्न होती है। उदाहरण के लिए, डेक्सट्रान जेल जी-10 की पृथक्करण सीमा 700 से कम है, जो छोटे आणविक पदार्थों के पृथक्करण के लिए उपयुक्त है; सेफैडेक्स जेल जी-200 की पृथक्करण सीमा 5000-600000 है, जो मैक्रोमोलेक्यूलर पदार्थों के पृथक्करण और शुद्धिकरण के लिए उपयुक्त है।

कॉलम स्थापना और संतुलन:
उपयोग से पहले डेक्सट्रान जेल का पूर्व-उपचार किया जाना चाहिए, जिसमें सूजन और कॉलम लोडिंग भी शामिल है। सूजन के लिए सूखे जेल को आसुत जल में कम से कम 24 घंटे के लिए डुबाना है, और जेल की पूरी सूजन सुनिश्चित करने के लिए उसे हिलाते रहना है। कॉलम स्थापित करते समय, कॉलम इंस्टॉलेशन आवश्यकताओं के अनुसार एक समय में सूजे हुए जेल को कॉलम में रखें, गीले कॉलम इंस्टॉलेशन को बनाए रखने पर ध्यान दें, और कॉलम में बुलबुले या दोष से बचें। कॉलम स्थापना के बाद, संतुलन उपचार की आवश्यकता होती है, जिसमें क्रोमैटोग्राफी कॉलम के कम से कम 3-5 कॉलम वॉल्यूम को संतुलित करने के लिए ऊपरी कॉलम से बफर समाधान का उपयोग करना शामिल होता है जब तक कि रिकॉर्डर की आधार रेखा स्थिर न हो जाए। संतुलन का उद्देश्य जेल कॉलम को स्थिर स्थिति तक पहुंचाना और पृथक्करण प्रभाव सुनिश्चित करना है।

पृथक्करण प्रभाव और नमूना आकार:
डेक्सट्रान जेल का पृथक्करण प्रभाव इसकी लोडिंग मात्रा से निकटता से संबंधित है। अत्यधिक या अपर्याप्त नमूना आकार पृथक्करण दक्षता को प्रभावित कर सकता है। सामान्यतया, जेल निस्पंदन की नमूना लोडिंग मात्रा आम तौर पर कॉलम बिस्तर की मात्रा का 5% से अधिक नहीं होती है। प्रारंभिक नमूना लोडिंग के लिए, बिस्तर की मात्रा को 1-2% पर नियंत्रित करने की सिफारिश की जाती है, जिसे पृथक्करण की स्थिति के आधार पर समायोजित किया जा सकता है। अलवणीकरण के दौरान नमूना मात्रा स्तंभ बिस्तर की मात्रा के 20% तक पहुंच सकती है। इसके अलावा, स्तंभ की ऊंचाई का चयन भी पृथक्करण आवश्यकताओं से संबंधित है। यदि स्तंभ की ऊंचाई बहुत अधिक है, तो जेल परत अधिक दबाव पैदा करेगी और पृथक्करण प्रभाव को प्रभावित करेगी। इसलिए, स्तंभ की ऊंचाई का चयन करते समय, इसे अलग किए गए पदार्थ के आणविक भार और पृथक्करण आवश्यकताओं के आधार पर निर्धारित किया जाना चाहिए।

निक्षालन विधि और पुनर्जनन उपचार:
डेक्सट्रान जेल के लिए कई निक्षालन विधियां हैं, जिनमें ब्राइन मुक्त निक्षालन, बफर निक्षालन और ग्रेडिएंट निक्षालन शामिल हैं। छोटे अणु पदार्थों को अलग करने के लिए खारा मुक्त निक्षालन उपयुक्त है; बड़े आणविक पदार्थों के पृथक्करण और शुद्धिकरण के लिए बफर रेफरेंस उपयुक्त है। ग्रेडिएंट एल्युएंट ऊपरी कॉलम बफर में NaCl जैसे ग्रेडिएंट पदार्थों को जोड़ने और एलुएंट की आयन शक्ति को बदलकर विभिन्न आणविक भार वाले पदार्थों को अलग करने की प्रक्रिया है। उपयोग की अवधि के बाद, कॉलम बेड में अवक्षेपित और जिद्दी अवशिष्ट प्रोटीन को हटाने के लिए डेक्सट्रान जेल को पुनर्जीवित करने की आवश्यकता होती है। पुनर्जनन उपचार के तरीकों में पानी के साथ बार-बार रिवर्स फ्लशिंग और बफर समाधान के साथ संतुलन शामिल है। लंबे समय तक संरक्षित जेल के लिए धुलाई, निर्जलीकरण और सुखाने की भी आवश्यकता होती है।

वैधता अवधि और भंडारण की शर्तें:
डेक्सट्रान जेल की वैधता अवधि उसके मॉडल और भंडारण स्थितियों के साथ भिन्न होती है। सामान्यतया, डेक्सट्रान जेल की वैधता अवधि कई महीनों से एक वर्ष तक भिन्न होती है। वैधता अवधि के भीतर, जेल को सूखी, ठंडी और अंधेरी जगह पर संग्रहित किया जाना चाहिए। अप्रयुक्त जेल को कमरे के तापमान पर संग्रहित किया जा सकता है; उपयोग के बाद, भंडारण से पहले जेल को ठीक से उपचारित किया जाना चाहिए। थोड़े समय के लिए संग्रहीत जेल के लिए, इसे साफ धोया जा सकता है और सूखा फ़िल्टर किया जा सकता है, उचित मात्रा में परिरक्षक (जैसे 0.02% सोडियम एज़ाइड) मिलाया जा सकता है या माइक्रोबियल विकास को नियंत्रित करने के लिए 20% इथेनॉल में भिगोया जा सकता है। लंबे समय तक संरक्षित जेल के लिए, इसे भंडारण के लिए कॉलम से बाहर निकाला जाना चाहिए, धोया जाना चाहिए, निर्जलित किया जाना चाहिए, सुखाया जाना चाहिए और बोतलबंद किया जाना चाहिए।