मेथिलीन नीलाडाई पाउडर एक जीवित डाई है। यह नीले पाउडर के रूप में एक क्षारीय डाई है और इसे पानी (घुलनशीलता 9.5%) और अल्कोहल (घुलनशीलता 6%) में भंग किया जा सकता है। गुणसूत्र आसानी से क्षारीय रंगों के साथ दाग कर रहे हैं।
मेथिलीन नीले समाधान के साथ धुंधला होने के बाद, गहरे नीले रंग का हिस्सा नाभिक है। मेथिलीन नीला नाभिक को नीला बनाने के लिए न्यूक्लिक एसिड को बांध सकता है। ट्राइपैन नीले रंग की मृत कोशिकाओं का तंत्र: पूर्ण झिल्ली संरचना के साथ सामान्य जीवित कोशिकाएं ट्रिपैन नीले रंग को अस्वीकार कर सकती हैं और इसे सेल में प्रवेश करने से रोक सकती हैं; हालांकि, गतिविधि या अपूर्ण कोशिका झिल्ली के नुकसान के साथ कोशिकाओं के लिए, सेल झिल्ली की पारगम्यता बढ़ जाती है और ट्राइपैन नीले रंग से नीले रंग से रंगा जा सकता है। यह आमतौर पर माना जाता है कि कोशिका की मृत्यु हो गई है यदि कोशिका झिल्ली की अखंडता खो जाती है। इसलिए, मृत कोशिकाओं से जीवित कोशिकाओं को अलग करने के लिए ट्राइपैन ब्लू स्टेनिंग बहुत सरल और तेज हो सकता है। ट्राइपैन ब्लू ऊतक और सेल संस्कृति में सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले मृत कोशिका पहचान और धुंधला तरीकों में से एक है।
पूर्ण झिल्ली संरचना के साथ सामान्य जीवित कोशिकाएं ट्रिपैन नीले रंग को अस्वीकार कर सकती हैं और इसे सेल में प्रवेश करने से रोक सकती हैं; हालांकि, गतिविधि या अपूर्ण कोशिका झिल्ली के नुकसान के साथ कोशिकाओं के लिए, सेल झिल्ली की पारगम्यता बढ़ जाती है और ट्राइपैन नीले रंग से नीले रंग से रंगा जा सकता है। यह आमतौर पर माना जाता है कि कोशिका की मृत्यु हो गई है यदि कोशिका झिल्ली की अखंडता खो जाती है। इसलिए, मृत कोशिकाओं से जीवित कोशिकाओं को अलग करने के लिए ट्राइपैन ब्लू स्टेनिंग बहुत सरल और तेज हो सकता है। ट्राइपैन ब्लू ऊतक और सेल संस्कृति में सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले मृत कोशिका पहचान और धुंधला तरीकों में से एक है।
मेथिलीन नीलापहली बार 1876 में जस्ता क्लोराइड के साथ संश्लेषित किया गया था। वर्तमान में, साहित्य में रिपोर्ट किए गए इसके सिंथेटिक मार्गों में मुख्य रूप से निम्नलिखित दो तरीके शामिल हैं:
विधि 1: कच्चे माल के रूप में एन, एन-डाइमिथाइल-पी-फेनिलीनेडियामाइन का उपयोग करते हुए, 2-एमिनो-5-डाइमिथाइलमिनोफेनिल थायोसल्फोनिक एसिड को मैंगनीज डाइऑक्साइड के साथ ऑक्सीकरण और सोडियम थायोसल्फेट के साथ प्रतिस्थापन द्वारा प्राप्त किया गया था। उत्तरार्द्ध को एन, एन-डाइमेथिलैनिलाइन के साथ संघनित किया गया था और फिर मेथिलीन ब्लू जिंक क्लोराइड प्राप्त करने के लिए मैंगनीज डाइऑक्साइड और कॉपर सल्फेट के साथ ऑक्सीकरण और साइक्लाइज़ किया गया था। उत्तरार्द्ध को सोडियम कार्बोनेट के साथ बेअसर किया जाता है ताकि लक्ष्य यौगिक मेथिलीन नीला हो सके।
विधि 2: एन, एन-डाइमिथाइल-फेनिलीनेडियामाइन को एन, एन-डाइमिथाइलनिलाइन से नाइट्रोसेशन और लोहे के पाउडर के साथ कमी से प्राप्त किया गया था। उत्तरार्द्ध को सोडियम डाइक्रोमेट द्वारा ऑक्सीकरण किया जाता है और 2-एमिनो-5-डाइमिथाइलमिनोफेनिल थायोसल्फोनिक एसिड प्राप्त करने के लिए सोडियम थायोसल्फेट द्वारा प्रतिस्थापित किया जाता है। एन के साथ संक्षेपण के बाद, एन-डाइमिथाइलनिलाइन को दूषित किया जाता है और मेथिलीन ब्लू जिंक क्लोराइड प्राप्त करने के लिए सोडियम डाइक्रोमेट और कॉपर सल्फेट द्वारा साइक्लाइज़ किया जाता है। उत्तरार्द्ध को सोडियम कार्बोनेट के साथ बेअसर किया जाता है ताकि लक्ष्य यौगिक मेथिलीन नीला हो सके।
उपरोक्त दो विधियों के प्रतिक्रिया मार्गों को दोहराया जाता है, और अंतर मुख्य रूप से प्रतिक्रिया प्रक्रिया में ऑक्सीडेंट के विभिन्न चयन में निहित है। विधियाँ 1 और 2 cyclization से पहले कम तापमान पर प्रतिक्रिया करते हैं। खिलाने की प्रक्रिया बोझिल है, जो औद्योगिक उत्पादन के लिए अनुकूल नहीं है; प्रतिक्रिया प्रक्रिया पहले मेथिलीन नीले रंग के बाइसल्फेट को प्राप्त करना है और फिर इसे मेथिलीन नीले रंग को प्राप्त करने के लिए इलाज करना है ताकि प्रतिक्रिया समय अपेक्षाकृत लंबा हो।
मेथिलीन नीलाव्यापक रूप से रासायनिक संकेतकों, रंजक, प्राकृतिक रंगों और दवाओं में उपयोग किया जाता है। खासतौर पर रंगाई उद्योग में इसका इस्तेमाल स्याही बनाने के लिए किया जाता है। हालांकि, मेथिलीन ब्लू ने पारिस्थितिक पर्यावरण को गंभीर नुकसान पहुंचाया है और इसकी विषाक्तता और कठिन हटाने के कारण मानव शरीर को अप्राप्य क्षति हुई है।