हेमेटोक्सिलिन पाउडर, CAS 517-28-2 और आणविक सूत्र C16H14O6 वाला एक प्राकृतिक रंग, दक्षिण अमेरिका में हेमाटोक्सिलीन कैंपेचियानम की सूखी शाखाओं से ईथर का उपयोग करके निकाला गया एक रंगद्रव्य है। यह सबसे अधिक इस्तेमाल किए जाने वाले रंगों में से एक है और एक प्राकृतिक माध्यम रंग है। रेशम, फर और चमड़े की रंगाई के लिए इस्तेमाल किया जाता है, साथ ही सूती कपड़ों की छपाई के लिए भी, नीले या काले रंग प्राप्त करने के लिए विभिन्न रंगद्रव्य का उपयोग किया जा सकता है। जलीय घोल में, विशेष रूप से क्षारीय घोल में, यह आसानी से हवा द्वारा ऑक्सीकृत होकर लाल भूरे रंग का ऑक्सीकृत हेमाटोक्सिलिन बनाता है। हेमाटोक्सिलिन को सीधे रंगा नहीं जा सकता है और इसे उपयोग करने से पहले ऑक्सीकृत हेमाटोक्सिलिन (जिसे हेमाटोक्सिलिन भी कहा जाता है) में बदलने के लिए इसे अच्छी तरह हवादार क्षेत्र में रखा जाना चाहिए, जिसे "परिपक्वता" कहा जाता है। हेमाटोक्सिलिन की परिपक्वता प्रक्रिया में लंबा समय लगता है, और इसे जितना अधिक समय तक तैयार किया जाता है, इसकी धुंधला करने की शक्ति उतनी ही मजबूत होती है। रंगे हुए पदार्थ को रंगने की शक्ति प्राप्त करने से पहले मध्यस्थ के रूप में धातु के नमक की क्रिया से गुजरना चाहिए। इसलिए हेमेटोक्सिलिन डाई तैयार करते समय, एक मॉर्डेंट का उपयोग किया जाना चाहिए। आम मॉर्डेंट में एल्युमिनियम सल्फेट, पोटैशियम एलम और आयरन एलम शामिल हैं। हेमेटोक्सिलिन एक हल्के पीले से जंग लगे बैंगनी रंग का क्रिस्टलीय पदार्थ है जो ठंडे पानी, ईथर और ग्लिसरॉल में अघुलनशील है, गर्म पानी और गर्म अल्कोहल में आसानी से घुलनशील है, और क्षार, अमोनिया और बोरेक्स के घोल में घुलनशील है। यह कोशिका नाभिक को रंगने के लिए एक उत्कृष्ट सामग्री है और कोशिकाओं में विभिन्न संरचनाओं को विभिन्न रंगों में विभेदित कर सकती है। विभेदन के दौरान रंगे गए ऊतक का रंग उपचार के आधार पर भिन्न होता है। एक अम्लीय घोल (जैसे हाइड्रोक्लोरिक एसिड अल्कोहल) के साथ विभेदन के बाद, यह लाल हो जाता है, और पानी से धोने के बाद, यह फिर से नीला हो जाता है। एक क्षारीय घोल (जैसे अमोनिया पानी) के साथ विभेदन के बाद, यह नीला हो जाता है, और पानी से धोने के बाद, यह नीला काला हो जाता है। मुख्य रूप से नाभिक में क्रोमेटिन और साइटोप्लाज्म में राइबोसोम बैंगनी नीले रंग में दिखाई देते हैं; इओसिन एक अम्लीय रंग है जो मुख्य रूप से कोशिका द्रव्य और बाह्यकोशिकीय मैट्रिक्स में घटकों को लाल कर देता है। HE धुंधलापन ऊतक विज्ञान, भ्रूण विज्ञान और विकृति विज्ञान के शिक्षण और अनुसंधान में सबसे मौलिक और व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली तकनीक है।
रासायनिक सूत्र |
C16H14O6 |
सटीक द्रव्यमान |
302 |
आणविक वजन |
302 |
m/z |
302 (100.0%), 303 (17.3%), 304 (1.4%), 304 (1.2%) |
मूल विश्लेषण |
C, 63.58; H, 4.67; O, 31.76 |
हेमेटोक्सिलिन पाउडरहेमेटोक्सिलिन के नाम से भी जाना जाने वाला यह एक प्राकृतिक रंगद्रव्य है जिसे ईथर का उपयोग करके दक्षिण अमेरिकी सॉवुड (उष्णकटिबंधीय फलीदार पौधे) की सूखी शाखाओं से निकाला जाता है। इसका व्यापक रूप से जीव विज्ञान, चिकित्सा और रसायन विज्ञान के क्षेत्रों में रंग एजेंट के रूप में उपयोग किया जाता है। इसके अद्वितीय रासायनिक गुण और रंगाई प्रभाव इसे विभिन्न प्रयोगों और अध्ययनों में एक अपूरणीय भूमिका निभाते हैं।
1. कोशिका नाभिक और क्रोमेटिन का धुंधलापन
हेमेटोक्सिलिन का सबसे महत्वपूर्ण और आम तौर पर इस्तेमाल नाभिक और क्रोमेटिन के लिए एक धुंधला एजेंट के रूप में है। जैविक और चिकित्सा अनुसंधान में, कोशिकाओं को धुंधला करना कोशिका संरचना, आकृति विज्ञान और कार्य का निरीक्षण और विश्लेषण करने का एक महत्वपूर्ण साधन है। हेमेटोक्सिलिन कोशिका नाभिक के अंदर क्रोमेटिन को गहरे नीले या बैंगनी नीले रंग में रंग सकता है, जिससे माइक्रोस्कोप के नीचे कोशिका संरचना स्पष्ट रूप से दिखाई देती है। यह विशेषता हेमेटोक्सिलिन को पैथोलॉजी, साइटोलॉजी और जेनेटिक्स जैसे क्षेत्रों में एक अपरिहार्य उपकरण बनाती है।


2. रंगाई प्रक्रिया और तंत्र
हेमेटोक्सिलिन का उपयोग सीधे धुंधला करने के लिए नहीं किया जा सकता है, बल्कि इसके लिए "परिपक्वता" नामक प्रक्रिया की आवश्यकता होती है। इस प्रक्रिया के दौरान, हेमेटोक्सिलिन हवादार क्षेत्रों के संपर्क में आता है और धीरे-धीरे ऑक्सीकृत हेमेटोक्सिलिन (जिसे हेमेटोक्सिलिन भी कहा जाता है) में बदल जाता है ताकि धुंधला करने की क्षमता प्राप्त हो सके। इस प्रक्रिया में लंबा समय लगता है, और जैसे-जैसे समय बीतता है, कॉन्फ़िगर किए गए डाई समाधान की रंगाई शक्ति धीरे-धीरे बढ़ती जाएगी। इसके अलावा, हेमेटोक्सिलिन डाई तैयार करते समय, रंगे हुए पदार्थ की रंगाई शक्ति को बढ़ाने के लिए आमतौर पर एल्युमिनियम अमोनियम सल्फेट, पोटेशियम एलम और आयरन एलम जैसे मॉर्डेंट को जोड़ना आवश्यक होता है।
3.पैथोलॉजी में अनुप्रयोग
नियमित रोग संबंधी तैयारी में, हेमाटोक्सिलिन धुंधलापन बुनियादी धुंधलापन विधियों में से एक है। इसका उपयोग मुख्य रूप से ऊतक खंड और कोशिका स्मीयर बनाने और धुंधलापन के माध्यम से नाभिक और क्रोमेटिन को स्पष्ट रूप से दिखाई देने के लिए किया जाता है, जिससे रोग विशेषज्ञों को रोगों का निदान और विभेदन करने में मदद मिलती है। उदाहरण के लिए, ट्यूमर पैथोलॉजी में, ट्यूमर कोशिकाओं के परमाणु आकारिकी, क्रोमेटिन वितरण और माइटोटिक विशेषताओं को देखकर, ट्यूमर की सौम्य या घातक प्रकृति और विभेदन डिग्री को प्रारंभिक रूप से निर्धारित किया जा सकता है।


4. कोशिका विज्ञान में अनुप्रयोग
हेमाटोक्सिलिन कोशिका विज्ञान संबंधी शोध में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। धुंधलापन के माध्यम से, कोशिकाओं की आकृति विज्ञान, संरचना, आकार और व्यवस्था को स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है, जो कोशिका वृद्धि, विभाजन, विभेदन और कार्य का अध्ययन करने के लिए महत्वपूर्ण साक्ष्य प्रदान करता है। इसके अलावा, हेमाटोक्सिलिन का उपयोग अन्य रंगों (जैसे ईओसिन) के साथ मिलकर डबल धुंधलापन के लिए भी किया जा सकता है ताकि कोशिकाओं की संरचना और संरचना को अधिक व्यापक रूप से प्रदर्शित किया जा सके।
5. आनुवंशिकी में अनुप्रयोग
आनुवंशिक अनुसंधान में,हेमेटोक्सिलिन पाउडरगुणसूत्रों के रंग-रोगन के लिए भी इसका आमतौर पर उपयोग किया जाता है। गुणसूत्र आनुवंशिक जानकारी के वाहक होते हैं, और उनकी आकृति विज्ञान, संरचना और मात्रा का आनुवंशिक लक्षणों की अभिव्यक्ति पर महत्वपूर्ण प्रभाव पड़ता है। हेमाटोक्सिलिन रंग-रोगन के माध्यम से, गुणसूत्रों की आकृति विज्ञान और व्यवस्था को स्पष्ट रूप से देखा जा सकता है, जो आनुवंशिक नियमों, आनुवंशिक रोगों और आनुवंशिक इंजीनियरिंग का अध्ययन करने के लिए महत्वपूर्ण साधन प्रदान करता है।


6. आणविक जीव विज्ञान में अनुप्रयोग
आणविक जीव विज्ञान प्रौद्योगिकी के निरंतर विकास के साथ, आणविक जीव विज्ञान के क्षेत्र में हेमाटोक्सिलिन का अनुप्रयोग तेजी से व्यापक होता जा रहा है। उदाहरण के लिए, जीन अभिव्यक्ति अनुसंधान में, कोशिकाओं या ऊतकों में विशिष्ट जीन की अभिव्यक्ति को हेमाटोक्सिलिन धुंधलापन के माध्यम से देखा जा सकता है; जीन संपादन अनुसंधान में, हेमाटोक्सिलिन धुंधलापन का उपयोग प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है और
7. अन्य अनुप्रयोग
ऊपर बताए गए मुख्य अनुप्रयोगों के अलावा, हेमाटोक्सिलिन अन्य क्षेत्रों में भी महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। उदाहरण के लिए, पर्यावरण विज्ञान में, हेमाटोक्सिलिन धुंधलापन का उपयोग जल निकायों में सूक्ष्मजीव समुदाय संरचना का निरीक्षण करने के लिए किया जा सकता है; खाद्य विज्ञान में, हेमाटोक्सिलिन धुंधलापन का उपयोग भोजन में सूक्ष्मजीव संदूषण का पता लगाने के लिए किया जा सकता है।

हेमेटोक्सिलिन पाउडरहेमाटोक्सिलिन ईओसिन स्टेनिंग या HE स्टेनिंग के रूप में भी जाना जाता है, यह ऊतक विज्ञान में सबसे अधिक इस्तेमाल की जाने वाली स्टेनिंग विधियों में से एक है। HE स्टेनिंग एक प्रायोगिक तकनीक है जो आकृति विज्ञान पर आधारित है और ऊतकों और विभिन्न कोशिकाओं को रंगने के लिए लागू रासायनिक तकनीकों के साथ संयुक्त है, जिसका उपयोग ऊतक कोशिकाओं की शारीरिक, रोगात्मक और रासायनिक संरचना का अध्ययन करने के लिए किया जाता है। मूल सिद्धांत: डीऑक्सीराइबोन्यूक्लिक एसिड (DNA) के दो स्ट्रैंड पर फॉस्फेट समूह बाहर की ओर आवेशित, अम्लीय होते हैं और आसानी से आयनिक बंधों के माध्यम से धुंधला करने के लिए सकारात्मक रूप से आवेशित हेमाटोक्सिलिन मूल डाई से बंधे होते हैं। हेमाटोक्सिलिन को क्षारीय घोल में नीला कहा जाता है, इसलिए कोशिका नाभिक को नीले रंग से रंगा जाता है। ईओसिन Y एक रासायनिक रूप से संश्लेषित अम्लीय डाई है जो पानी में नकारात्मक रूप से आवेशित आयनों में विघटित हो जाती है और प्रोटीन अमीनो समूहों के सकारात्मक रूप से आवेशित धनायनों के साथ बंध जाती है ताकि कोशिका द्रव्य को रंगा जा सके। कोशिका द्रव्य, लाल रक्त कोशिकाएं, मांसपेशियां, संयोजी ऊतक और ईओसिन कणिकाओं को लाल या गुलाबी रंग की अलग-अलग डिग्री तक रंगा जाता है, जो नीले नाभिक के साथ एक तीव्र विपरीतता बनाते हैं। इओसिन कोशिका द्रव्य के लिए एक अच्छा रंग है। आम तौर पर, दागदार ऊतक स्लाइस की मोटाई लगभग 3 µ मीटर होती है, और केंद्रीय तंत्रिका तंत्र 6-8 µ मीटर होता है। ग्लोमेरुलर बेसमेंट मेम्ब्रेन धुंधलापन देखते समय, 1.5-2 µ मीटर की मानक मोटाई की आवश्यकता होती है। धुंधलापन परिणाम: कोशिका नाभिक को हेमाटोक्सिलिन के साथ नीले रंग में रंगा गया था। कोशिका द्रव्य, लाल रक्त कोशिकाएं, मांसपेशियां, संयोजी ऊतक और इओसिनोफिलिक कणिकाओं को इओसिन वाई द्वारा लाल या गुलाबी रंग की अलग-अलग डिग्री के साथ रंगा जाता है, जो नीले नाभिक के साथ एक तीव्र विपरीतता बनाता है। इस धुंधलापन विधि का आधार ऊतक संरचना में विभिन्न रंगों के बंधन की अलग-अलग डिग्री है। डाई हेमाटोक्सिलिन क्षारीय संरचनाओं को नीले बैंगनी रंग में रंग सकता है, जबकि इओसिन अम्लीय संरचनाओं को गुलाबी रंग में रंग सकता है। क्षारीय संरचनाओं में आमतौर पर न्यूक्लिक एसिड युक्त भाग शामिल होते हैं, जैसे कि राइबोसोम, नाभिक और साइटोप्लाज्म में राइबोन्यूक्लिक एसिड (RNA) से भरपूर क्षेत्र। इओसिनोफिलिक संरचनाएं आमतौर पर कोशिकाओं के भीतर और उनके बीच प्रोटीन से बनी होती हैं, जैसे कि लेविबॉडी, मैलोरीबॉडी और अधिकांश साइटोप्लाज्म। कभी-कभी, ऊतक में पहले से मौजूद पिगमेंट, जैसे कि मेलेनिन के कारण दाग वाले नमूनों में पीला भूरा रंग भी दिखाई दे सकता है।
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