एल-लाइसिन पाउडर, सफेद या लगभग सफेद मुक्त बहने वाले क्रिस्टलीय पाउडर; लगभग गंधहीन। आणविक सूत्र C6H14N2O2, CAS 56-87-1। यह हाइग्रोस्कोपिक है। पानी में बहुत घुलनशील, इथेनॉल में थोड़ा घुलनशील, ईथर में लगभग अघुलनशील। एल-लाइसिन मानव शरीर के लिए एक आवश्यक अमीनो एसिड है। यह संयोजी ऊतक और कार्निटाइन के संश्लेषण में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, ऊर्जा उत्पादन, बच्चों की वृद्धि और प्रतिरक्षा समारोह के रखरखाव। यह मुख्य रूप से फ़ीड एडिटिव, फूड फोर्टिफायर और फार्मेसी के रूप में उपयोग किया जाता है।
रासायनिक सूत्र |
C6H14N2O2 |
सटीक द्रव्यमान |
204 |
आणविक वजन |
204 |
m/z |
146 (100.0%), 147 (6.5%) |
मूल विश्लेषण |
C, 49.30; H, 9.65; N, 19.16; O, 21.89 |
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एल-लाइसिन पाउडर, मानव शरीर के लिए एक आवश्यक क्षारीय अमीनो एसिड के रूप में, विभिन्न क्षेत्रों जैसे कि दवा, भोजन, फ़ीड, कृषि, उद्योग और सौंदर्य प्रसाधन जैसे विभिन्न क्षेत्रों में व्यापक अनुप्रयोग मूल्य दिखाया है, जो इसकी अद्वितीय रासायनिक संरचना और शारीरिक कार्यों के कारण है।
1। पोषण संबंधी समर्थन और चयापचय विनियमन
एल-लाइसिन एक आवश्यक अमीनो एसिड है जिसे मानव शरीर अपने आप में संश्लेषित नहीं कर सकता है और आहार या पूरक के माध्यम से उपभोग करने की आवश्यकता है। इसके मुख्य कार्यों में शामिल हैं:
प्रोटीन संश्लेषण: कंकाल की मांसपेशी, एंजाइम, सीरम प्रोटीन और पेप्टाइड हार्मोन के एक घटक के रूप में, यह सेल मरम्मत और ऊतक पुनर्जनन में भाग लेता है। उदाहरण के लिए, L-Lysine के पोस्टऑपरेटिव पूरकता से रोगियों में घाव भरने में तेजी आ सकती है।
ऊर्जा चयापचय अनुकूलन: कार्निटाइन संश्लेषण के लिए एक अग्रदूत पदार्थ के रूप में, यह फैटी एसिड बीटा ऑक्सीकरण को बढ़ावा देता है और हृदय और मांसपेशियों जैसे ऊतकों के लिए ऊर्जा प्रदान करता है। नैदानिक अध्ययनों से पता चला है कि एल-लाइसिन के साथ पूरक क्रोनिक थकान सिंड्रोम वाले रोगियों में व्यायाम धीरज में सुधार कर सकते हैं।
खनिज अवशोषण वृद्धि: घुलनशील परिसरों को बनाने के लिए कैल्शियम और लोहे जैसे खनिजों को चेल्ट करके, जैवउपलब्धता में सुधार होता है। उदाहरण के लिए, विटामिन डी के साथ synergistic प्रभाव बच्चों में हड्डी के घनत्व को काफी बढ़ा सकता है और रिकेट्स को रोक सकता है।
2। रोग उपचार और सहायक हस्तक्षेप
एंटीवायरल और प्रतिरक्षा विनियमन: एल-लाइसिन आर्गिनिन चयापचय मार्ग को रोकता है और हर्पीज सिंप्लेक्स वायरस (एचएसवी) प्रतिकृति के लिए आवश्यक एंजाइम गतिविधि को अवरुद्ध करता है। कई डबल-ब्लाइंड परीक्षणों ने पुष्टि की है कि 1000-3000mg L-lysine के दैनिक मौखिक प्रशासन दाद के प्रकोपों की अवधि को छोटा कर सकते हैं और पुनरावृत्ति दर को कम कर सकते हैं।
हृदय सुरक्षा: मेथिओनिन के साथ संयुक्त प्लाज्मा होमोसिस्टीन स्तर को कम कर सकता है और एथेरोस्क्लेरोसिस के जोखिम को कम कर सकता है। पशु प्रयोगों से पता चला है कि एल-लाइसिन एंजियोटेंसिन-परिवर्तित एंजाइम (एसीई) की गतिविधि को रोक सकता है, जिससे एक हाइपोटेंसिव प्रभाव होता है।
एनीमिया उपचार: एक लोहे के अवशोषण बढ़ाने के रूप में, एल-लाइसिन हीमोग्लोबिन संश्लेषण की दक्षता को बढ़ा सकता है।
जब लोहे की कमी वाले एनीमिया के इलाज के लिए लौह यौगिकों के साथ संयुक्त होता है, तो पारंपरिक लोहे की खुराक की तुलना में इसकी जैवउपलब्धता में 40% से अधिक की वृद्धि होती है।
ड्रग एन्हांसमेंट: टेट्रासाइक्लिन एंटीबायोटिक दवाओं में एल-लाइसिन को जोड़ने से जठरांत्र संबंधी जलन कम हो सकती है और स्थिर परिसरों का निर्माण करके जीवाणुरोधी गतिविधि को बढ़ा सकता है। इसके अलावा, एल-लाइसिन का उपयोग लीड पॉइज़निंग के उपचार में सहायता करने और क्लोराइड उत्सर्जन को बढ़ावा देने में सहायता के लिए एक मूत्रवर्धक के रूप में भी किया जा सकता है।
3। विशेष चिकित्सा उद्देश्यों के लिए सूत्र खाद्य पदार्थ
चयापचय संबंधी विकारों जैसे कि फेनिलकेटोनोरिया (पीकेयू), एल-लाइसिन, एक कम फेनिलएलनिन आहार के एक प्रमुख घटक के रूप में, चयापचय संकटों को ट्रिगर किए बिना आवश्यक अमीनो एसिड समर्थन प्रदान कर सकते हैं। पैरेंट्रल पोषण की तैयारी में, समग्र अमीनो एसिड जलसेक में हाइड्रोलाइज्ड प्रोटीन जलसेक की तुलना में उच्च शुद्धता और कम एलर्जी जोखिम के फायदे हैं।
खाद्य उद्योग: पोषण संबंधी किलेबंदी और कार्यात्मक सुधार में इनोवेटर्स
1। मूल पोषण सुदृढीकरण
अनाज उत्पादों में सुधार: गेहूं और चावल जैसे अनाज में एल-लाइसिन की कमी (पहली सीमित अमीनो एसिड) की समस्या के जवाब में, 0.1-0.5g/किग्रा जोड़ने से प्रोटीन जैव उपलब्धता (BV) को 30%तक बढ़ा सकता है। उदाहरण के लिए, थाईलैंड में विकसित लिसिन गढ़वाले चावल ने बच्चों के प्रोटीन सेवन में 22%की वृद्धि की।
डेयरी उत्पाद अपग्रेड: शिशु फार्मूला में एल-लाइसिन को जोड़ना स्तन के दूध के अमीनो एसिड प्रोफाइल को अनुकरण कर सकता है और शिशु की प्रतिरक्षा प्रणाली के विकास को बढ़ावा दे सकता है। अनुसंधान से पता चला है कि इस प्रकार के सूत्र के साथ खिलाए जाने वाले शिशुओं में सीरम आईजीए स्तर होता है जो नियमित सूत्र के साथ खिलाए गए लोगों की तुलना में 18% अधिक होता है।
2। कार्यात्मक खाद्य पदार्थों का विकास
स्पोर्ट्स न्यूट्रिशन: ब्रांकेड चेन एमिनो एसिड (बीसीएएएस) के सीओ एजेंट के रूप में, एल-लाइसिन व्यायाम के बाद मांसपेशियों के प्रोटीन के टूटने को कम कर सकता है। बाजार में स्पोर्ट्स ड्रिंक अक्सर रिकवरी में तेजी लाने के लिए 500-1000mg/बोतल जोड़ते हैं।
बुजुर्ग पोषण: बुजुर्गों में प्रोटीन संश्लेषण की क्षमता में गिरावट के जवाब में, एल-लाइसिन और विटामिन बी 12 का संयोजन मांसपेशियों के द्रव्यमान में सुधार कर सकता है और गिरने के जोखिम को कम कर सकता है। जापान में विकसित बुजुर्ग विशिष्ट पोषण पाउडर में एल-लाइसिन सामग्री 2 जी/100 ग्राम तक पहुंचती है।
3। खाद्य संरक्षण और स्वाद में सुधार
डिब्बाबंद भोजन का दुर्गन्ध: एल-लाइसिन कैन्ड मीट के शेल्फ जीवन को बढ़ाते हुए, धातु आयनों को चेल्ट करके लिपिड ऑक्सीकरण को रोकता है। प्रयोगों से पता चला है कि 0.3% जोड़ने से डिब्बाबंद मछली के शेल्फ जीवन को 6 महीने तक बढ़ा सकते हैं।
सीज़निंग डेवलपमेंट: मोनोसोडियम ग्लूटामेट के विकल्प के रूप में, L-Lysine UMAMI धारणा सीमा को बढ़ा सकता है। कम सोडियम नमक योगों में, पोटेशियम क्लोराइड के साथ इसका संयोजन धातु के स्वादों को मास्क कर सकता है और तालमेल को बढ़ा सकता है।
फ़ीड उद्योग: पशु विकास के लिए बायोकेटलिस्ट
1। मोनोगैस्ट्रिक जानवरों के लिए पोषण वृद्धि
सुअर फ़ीड का अनुप्रयोग: कॉर्न सोयाबीन भोजन आहार में 0.1-0.2% L-Lysine जोड़ने से पिगलेट्स के दैनिक वजन में 12-15% की वृद्धि हो सकती है और फ़ीड रूपांतरण दर में 8-10% में सुधार हो सकता है। कार्रवाई के तंत्र में शामिल हैं:
गैस्ट्रिक प्रोटीज के स्राव को उत्तेजित करें और प्रोटीन पाचन दर में सुधार करें
इंसुलिन जैसी वृद्धि कारक -1 (IGF-1) के स्राव को बढ़ावा दें
अमीनो एसिड संतुलन को विनियमित करें और नाइट्रोजन उत्सर्जन को कम करें
पोल्ट्री फीड ऑप्टिमाइज़ेशन: ब्रायलर फ़ीड में एल-लाइसिन जोड़ने से स्तन की मांसपेशियों के प्रतिशत में काफी सुधार हो सकता है। अनुसंधान से पता चला है कि पेट की वसा के बयान को कम करते हुए 0.15% जोड़ सीने की मांसपेशियों के उत्पादन को 9% बढ़ाता है।
2। जुगाली करने वालों का पोषण विनियमन
रुमेन संरक्षित एल-लाइसिन ने रुमेन सुरक्षा तकनीक के माध्यम से तैयार किया, रुमेन सूक्ष्मजीवों के क्षरण को दरकिनार कर सकता है और छोटी आंत द्वारा सीधे अवशोषित किया जा सकता है। डेयरी गायों के आहार में 30 ग्राम/दिन जोड़ने से दूध उत्पादन में 2.5 किग्रा/दिन की वृद्धि हो सकती है और दूध प्रोटीन सामग्री को 0.15 प्रतिशत अंक बढ़ा सकते हैं।
3। जलीय फ़ीड में नवाचार
दक्षिण अमेरिकी सफेद झींगा के फ़ीड में 0.3% एल-लाइसिन जोड़ने से विशिष्ट विकास दर (एसजीआर) और फीड दक्षता (एफई) में काफी सुधार हो सकता है। यह प्रतिरक्षा संबंधी जीन की अभिव्यक्ति को बढ़ाता है, जिससे WSSV वायरस का 40%तक विरोध करने के लिए झींगा की क्षमता बढ़ जाती है।
कृषि क्षेत्र: हरे रोपण के लिए बायोस्टिमुलेंट्स
1। पौधे की वृद्धि विनियमन
नाइट्रोजन उपयोग अनुकूलन: L-Lysine, एक नाइट्रिफिकेशन अवरोधक के रूप में, मिट्टी में नाइट्रेट नाइट्रोजन में अमोनियम नाइट्रोजन के रूपांतरण को धीमा कर सकता है और नाइट्रोजन उर्वरक उपयोग दक्षता में 15-20%तक सुधार कर सकता है। चावल के खेतों में, यूरिया के साथ इसका संयोजन उपज में 8%बढ़ सकता है।
संवर्धित तनाव प्रतिरोध: प्रोलाइन संश्लेषण को प्रेरित करके, L-Lysine पौधे के सूखे प्रतिरोध को बढ़ा सकता है। 0.5 मिमी के साथ उपचार के बाद, सूखे के तनाव के तहत टमाटर के रोपाई की उत्तरजीविता दर में 35%की वृद्धि हुई।
2। बायोपीस्टिकैड्स का विकास
एल-लाइसिन पाउडरडेरिवेटिव (जैसे कि कॉपर लाइसिन) व्यापक स्पेक्ट्रम जीवाणुरोधी गतिविधि को प्रदर्शित करता है, जिसमें ककड़ी डाउनी फफूंदी और चावल विस्फोट रोग जैसे रोगजनकों के खिलाफ 70% से अधिक की निषेध दर होती है। कार्रवाई के तंत्र में सेल झिल्ली अखंडता को बाधित करना और बीजाणु अंकुरण को बाधित करना शामिल है।
1। अमीनो एसिड डेरिवेटिव का संश्लेषण
एल-ओर्निथिन उत्पादन: एल-ओर्निथिन को हेपेटिक एन्सेफैलोपैथी के उपचार के लिए, कोरेनेबैक्टीरियम ग्लूटामिकम के किण्वन विधि के माध्यम से एक अग्रदूत के रूप में एल-लाइसिन का उपयोग करके कुशलता से संश्लेषित किया जा सकता है।
Ε - पॉलीलिसीन की तैयारी: एक प्राकृतिक भोजन परिरक्षक के रूप में, ε - पॉलीलिसीन स्ट्रेप्टोमी के किण्वन द्वारा निर्मित होता है, और इसके जीवाणुरोधी स्पेक्ट्रम में ग्राम पॉजिटिव/नकारात्मक बैक्टीरिया और मोल्ड्स शामिल होते हैं। यह रोटी संरक्षण में तीन बार शेल्फ जीवन का विस्तार कर सकता है।
2। बायोमैटिरियल्स का विकास
क्रॉस-लिंकिंग एल-लाइसिन और सोडियम एल्गिनेट द्वारा तैयार किए गए हाइड्रोजेल में पीएच उत्तरदायी दवा रिलीज की विशेषताएं हैं। मधुमेह के घाव की ड्रेसिंग में, यह लगातार उपचार में तेजी लाने के लिए 72 घंटे के लिए इंसुलिन जारी कर सकता है।
सौंदर्य प्रसाधन विज्ञान: त्वचा की मरम्मत के लिए सक्रिय कारक
1। एंटी एजिंग मैकेनिज्म
एल -लाइसिन टीजीएफ - /एसएमएडी सिग्नलिंग मार्ग को त्वचीय फाइब्रोब्लास्ट में सक्रिय करके टाइप I कोलेजन संश्लेषण को बढ़ावा देता है। नैदानिक परीक्षणों से पता चला कि 2% एल-लाइसिन युक्त सार के 8 सप्ताह के उपयोग के बाद, आंखों की झुर्रियों की गहराई में 23% की कमी आई।
2। एक टाइरोसिनेस इनहिबिटर के रूप में, एल-लाइसिन प्रभावकारिता को सफेद करने और बढ़ाने के लिए मेलेनिन संश्लेषण मार्ग को अवरुद्ध कर सकता है। नियासिनमाइड के साथ तैयार किए गए सूत्र ने एशियाई जनसंख्या परीक्षण में 1.5 रंग चरणों में त्वचा की चमक में वृद्धि की।
L-Lysine की तैयारी:
मीट्रिक रोलर श्रृंखला की सामग्री
रिपोर्ट 1:
(1) शुद्ध पानी (विआयनीकृत पानी) को l ‑ lysine हाइड्रोक्लोराइड में जोड़ें। शुद्ध पानी के लिए L - lysine हाइड्रोक्लोराइड का वजन अनुपात 1 ∶ 1 है। अच्छी तरह से मिलाएं और पूरी तरह से भंग करें। इसे भविष्य के उपयोग के लिए रखें;
(२) ऊपरी स्तंभ सोखना
13L/मिनट के प्रवाह दर पर cation एक्सचेंज राल के साथ आयन एक्सचेंज कॉलम में चरण (1) में प्राप्त समाधान को जोड़ें, जब तक कि राल केशन एक्सचेंज राल पूरी तरह से adsorbs lysine और स्तंभ के प्रवाह में lysine नहीं होता है, तो एक्सचेंज कॉलम में राल के माध्यम से शुद्ध पानी से धोएं, जब तक कि यह नहीं है कि वह स्तंभ में नहीं है।
(३) क्षालन
फिर धोने के लिए 2mol/l nh4oh (अमोनिया पानी) का उपयोग करेंएल-लाइसिन पाउडर। NH4OH 13L/मिनट की प्रवाह दर पर आयन एक्सचेंज कॉलम के माध्यम से बहता है। जब आयन एक्सचेंज कॉलम से अपशिष्ट का पीएच मान 8.0 तक बढ़ जाता है, तो अपशिष्टता में निनहाइड्रिन प्रतिक्रिया शुरू हो जाती है, अर्थात, एल-लाइसिन बहना शुरू हो जाता है, और प्रवाह एकत्र किया जाता है; जब आयन-एक्सचेंज कॉलम के प्रवाह का पीएच मान 9.0 ~ 12 तक बढ़ जाता है, तो निनहाइड्रिन प्रतिक्रिया रंग अंधेरा होता है, और इस समय एल-लाइसिन की सामग्री अधिक होती है। संग्रह को रोक दिया जा सकता है जब अपशिष्ट को तब तक eluted किया जाता है जब तक कि कोई निनहाइड्रिन प्रतिक्रिया न हो;
(४) वैक्यूम एकाग्रता
अमोनिया को चलाने के लिए कम दबाव के तहत 0.2MPa और 60 - 62 डिग्री पर एकत्रित समाधान को केंद्रित करें। जब यह मूल एकत्रित समाधान की मात्रा के 1/3 से केंद्रित होता है, तो इस समय केंद्रित समाधान के 3.5% वजन को जोड़ने, फ़िल्टर करने, ठंडा और क्रिस्टलीकरण करने के लिए, और फिर एल-लाइसिन प्राप्त करने के लिए जोड़ें।
पोटेंशियोमेट्रिक टाइट्रेटर द्वारा मापा और गणना की गई उत्पाद की शुद्धता 98.5%है।
रिपोर्ट 2:
मुफ्त एल-लाइसिन सॉलिड की तैयारी: वजन 1.00 किलोग्राम एल-लेसीन हाइड्रोक्लोराइड का वजन करें और इसे हलचल करने, भंग करने और स्पष्ट करने के लिए 5.0L शुद्ध पानी में जोड़ें, फिर 7.20 किलोग्राम सक्रिय मजबूत एसिड सेशन एक्सचेंज राल कॉलम में समाधान जोड़ें, धीरे-धीरे राल कॉलम को धोने के लिए, 2-3H धोने के बाद कागज़)। राल कॉलम में 11.1kg5% v/v अमोनिया जोड़ें, और धीरे-धीरे राल कॉलम को लगभग 2-3h के लिए फ्लश करें। जब पीएच मान 10 से अधिक हो जाता है, तो पीएच मान लगभग 10 तक घटने तक क्षारीय एलुएंट को इकट्ठा करना शुरू करें। कम दबाव के तहत 60 डिग्री (- 0.10 - -0.08 एमपीए) पर एकत्रित समाधान को केंद्रित करें। पानी और अमोनिया को केंद्रित करें जब तक कि कोई तरल नहीं टपकता। सफेद ठोस में ध्यान केंद्रित करना जारी रखें। सिस्टम में 8 एल निरपेक्ष इथेनॉल जोड़ें। हराना और क्रिस्टलीकृत करना जारी रखें। 3h के लिए हराया। सभी ठोस पदार्थों की उपेक्षा करें। अपकेंद्रित्र और ठोस को तब तक फ़िल्टर करें जब तक कि कोई तरल नहीं टपकता। 8h के लिए तामचीनी ट्रे, वैक्यूम ड्राई (60 {5 डिग्री, - 0.08 - -0.1 एमपीए) पर फ़िल्टर केक बिछाएं, और कमरे के तापमान पर उत्पाद को ठंडा करें, 96.95% की उपज और 99.62% की शुद्धता के साथ 776 ग्राम मुफ्त एल-लिसेनी ठोस प्राप्त करने के लिए एक ठंडे बैग में स्टोर करें। HNMR (D2O): 3.223-3.188 (CHN), 2.848-2.794 (2H/CH2N), 1.542-1.523 और 1.276 (-CH2CH2CH2CH 2 -)। LCMS (M +1): 147.1127।
रिपोर्ट 3:
एल-लाइसिन की किण्वन विधि में तीन चरण शामिल हैं: लाइसिन प्राथमिक बीज संस्कृति, लाइसिन माध्यमिक बीज संस्कृति और लाइसिन किण्वन संस्कृति। प्रत्येक चरण के विशिष्ट संचालन इस प्रकार हैं:
1। लाइसिन प्राथमिक बीज संस्कृति
लाइसिन प्राथमिक बीज संस्कृति माध्यम तैयार करें। इस उदाहरण में, लाइसिन प्राथमिक बीज संस्कृति के माध्यम में 20g/l sucrose, 0.5g/l मैग्नीशियम सल्फेट, 1.5g/L पोटेशियम डायहाइड्रोजन फॉस्फेट, 9g/l अमोनियम सल्फेट, 5g/l खमीर अर्क, 0.5g/l threonine, 0.5g/l monodium, 7g/l monodium, 7g/l methionine, 7g/l methionine, 7g/l methionine, 7g/l कैल्शियम एसीटेट।
तैयार लाइसिन प्राथमिक बीज संस्कृति माध्यम को 20% (वॉल्यूम अनुपात) पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड समाधान के साथ पीएच 6.0 में समायोजित करें, मध्यम को 121 डिग्री तक भाप के साथ गर्म करें, इसे 20min के लिए स्टरलाइज़ करें, और इसे 36 डिग्री तक ठंडा करने के लिए पानी को खुला करें और इसे स्थिर रखें। 300 आरपीएम के लिए हिलाएं, बाँझ हवा को 1: 0.4 के वेंटिलेशन अनुपात के अनुसार इंजेक्ट करें, टैंक के दबाव को 0.05 एमपीए में समायोजित करें, पीएच को 6.7 को अमोनिया पानी के साथ समायोजित करें और इसे स्थिर रखें, और 100% विघटित ऑक्सीजन को कैलिब्रेट करें।
एस्चेरिचिया कोलाई शेक फ्लास्क सीड का उत्पादन करने वाले एल-लाइसिन को एल-लाइसिन प्राथमिक बीज संस्कृति माध्यम में प्राप्त किया गया था।एल-लाइसिन पाउडरसंस्कृति के लिए प्राथमिक बीज संस्कृति माध्यम। संस्कृति प्रक्रिया के दौरान, 30-50% भंग ऑक्सीजन को रोटेशन की गति, हवा की मात्रा और टैंक दबाव को समायोजित करके नियंत्रित किया गया था। 10 घंटे की संस्कृति के बाद, सूक्ष्म निरीक्षण के लिए हर 2 घंटे में नमूने लिए गए और कुल चीनी को मापा गया। जब सेल आकृति विज्ञान का सूक्ष्म निरीक्षण सामान्य था और कुल चीनी 10 ग्राम/एल तक गिरा, तो संस्कृति को लाइसिन परिपक्व प्राथमिक बीज तरल प्राप्त करने के लिए रोक दिया गया था।
2। लाइसिन की द्वितीयक बीज संस्कृति
लाइसिन माध्यमिक बीज संस्कृति माध्यम तैयार करें। इस उदाहरण में, लाइसिन सेकेंडरी सीड कल्चर माध्यम में ग्लूकोज 70g/L, मैग्नीशियम सल्फेट 1G/L, पोटेशियम डायहाइड्रोजेन फॉस्फेट 1G/L, अमोनियम सल्फेट 10G/L, कॉर्न स्टार्च हाइड्रोलाइजेट 1G/L, हेयर हाइड्रोलाइजेट 1G/L, BEET MATHEN/L, THREON/L, THRENIN एसीटेट 2 जी/एल।
तैयार लाइसिन माध्यमिक बीज संस्कृति माध्यम के पीएच को 6.2 अमोनिया पानी के साथ समायोजित करें, मध्यम को 121 डिग्री तक भाप के साथ गर्म करें, इसे 20 मिनट के लिए स्टरलाइज़ करें, और इसे 37 डिग्री तक ठंडा करने के लिए पानी खोलें और इसे स्थिर रखें। 300 आरपीएम के लिए मिश्रण को खोलें, बाँझ हवा को 1: 0.4 के वेंटिलेशन अनुपात के अनुसार इंजेक्ट करें, टैंक के दबाव को 0.05 एमपीए में समायोजित करें, पीएच मान को 6.6 पर अमोनिया पानी के साथ समायोजित करें और इसे स्थिर रखें, और विघटित ऑक्सीजन को 100%तक कैलिब्रेट करें। चरण (1) में प्राप्त परिपक्व लाइसिन प्राथमिक बीज समाधान संस्कृति के लिए लाइसिन माध्यमिक बीज संस्कृति माध्यम की मात्रा के 2% पर लाइसिन माध्यमिक बीज संस्कृति माध्यम में प्राप्त किया जाता है। संस्कृति प्रक्रिया के दौरान, 30-50% भंग ऑक्सीजन को रोटेशन की गति, हवा की मात्रा और टैंक दबाव को समायोजित करके नियंत्रित किया जाता है। 10 घंटे की संस्कृति के बाद, नमूने सूक्ष्म निरीक्षण के लिए हर 2 घंटे में लिए जाते हैं और चीनी को कम करने के लिए। जब सेल आकृति विज्ञान का सूक्ष्म निरीक्षण सामान्य होता है और चीनी को कम करने से 8 ग्राम/एल हो जाता है, तो संस्कृति को परिपक्व लाइसिन माध्यमिक बीज समाधान प्राप्त करने के लिए रोक दिया जाता है।
3। लाइसिन किण्वन संस्कृति
लाइसिन किण्वन माध्यम तैयार करें। इस उदाहरण में, लाइसिन किण्वन माध्यम में ग्लूकोज 20 ग्राम/एल, मैग्नीशियम सल्फेट 0.5 ग्राम/एल, फॉस्फोरिक एसिड 0.3 ग्राम/एल, अमोनियम सल्फेट 9 ग्राम/एल, कॉर्न स्टार्च हाइड्रोलाइज़ेट 0.5 ग्राम/एल, हेयर हाइड्रोलाइजेट 0.5 ग्राम/एल, बीट मोल्स 10 एमएल/एल, बीटेन 0.5 गिनेट 0.
तैयार लाइसिन किण्वन माध्यम के पीएच को 20% पोटेशियम हाइड्रॉक्साइड के साथ 5.6 पर समायोजित करें, मध्यम को 121 डिग्री तक भाप के साथ गर्म करें, इसे 20 मिनट के लिए स्टरलाइज़ करें, और इसे 36 डिग्री तक ठंडा करने के लिए परिसंचारी पानी खोलें और इसे स्थिर रखें। 400rpm पर मिश्रण शुरू करें, बाँझ हवा को 1: 0.3 के वेंटिलेशन अनुपात के अनुसार इंजेक्ट करें, टैंक के दबाव को 0.07mpa में समायोजित करें, पीएच मान को 6.7 को अमोनिया पानी के साथ समायोजित करें और इसे स्थिर रखें, और विघटित ऑक्सीजन को 100%तक कैलिब्रेट करें। चरण (2) में प्राप्त परिपक्व लाइसिन माध्यमिक बीज तरल को 10% की मात्रा के द्वारा लाइसिन किण्वन माध्यम में जोड़ा जाता हैएल-लाइसिन पाउडरसंस्कृति के लिए किण्वन माध्यम। संस्कृति प्रक्रिया के दौरान, भंग ऑक्सीजन को गति, हवा की मात्रा और टैंक दबाव को समायोजित करके 25-40% द्वारा नियंत्रित किया जाता है।
संस्कृति प्रक्रिया के दौरान, हर 2 एच में किण्वन तरल के चीनी एकाग्रता और अमोनिया नाइट्रोजन एकाग्रता को कम करने और मापने का नमूना। जब किण्वन तरल में चीनी एकाग्रता को कम करने से 4 जी/एल तक गिरता है, तो 60% (एम/वी) ग्लूकोज समाधान जोड़ना शुरू करें और लगभग 4 जी/एल पर किण्वन तरल की चीनी एकाग्रता को कम करने के लिए बनाए रखें। जब किण्वन तरल में अमोनिया नाइट्रोजन एकाग्रता 1G/L पर गिरती है, तो 40% (m/v) अमोनियम सल्फेट समाधान जोड़ना शुरू करें और लगभग 1g/L पर किण्वन तरल के अमोनिया नाइट्रोजन एकाग्रता को बनाए रखें।
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