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आलिंद नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड चूहा, जिसे कार्डियक नैट्रियूरेटिक हार्मोन और एट्रियल नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड के रूप में भी जाना जाता है, नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड्स के परिवार से संबंधित है। यह एक प्रकार का सक्रिय पॉलीपेप्टाइड है जो एट्रिया द्वारा संश्लेषित, संग्रहीत और स्रावित होता है, जिसे एट्रियल नैट्रियूरेटिक फैक्टर (एएनएफ) या एट्रियल नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (एएनपी) के रूप में भी जाना जाता है। इसमें शक्तिशाली नैट्रियूरेटिक, मूत्रवर्धक, वासोडिलेटरी, रक्तचाप कम करने वाला और एंटीरेनालिन {3}एंजियोटेंसिन प्रणाली और एंटीडाययूरेटिक हार्मोन प्रभाव होता है। सीरम एएनपी गतिविधि का मापन हृदय विफलता वाले रोगियों के पाठ्यक्रम और परिणाम का निदान और निगरानी करने के लिए किया जाता है।
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| घनत्व | 1.54±0.1 ग्राम/सेमी3(अनुमानित) |
| भंडारण की स्थिति | -20 डिग्री |
| जल घुलनशीलता | पानी में 1 मिलीग्राम/एमएल तक घुलनशील |
| शुद्धता (एचपीएलसी) | 98.0% से अधिक या उसके बराबर |
| एसीटेट सामग्री | 12.0% से कम या उसके बराबर |
| पानी की मात्रा | 8.0 से कम या इसके बराबर |
| पेप्टाइड सामग्री | 80.0 से अधिक या उसके बराबर |
| अन्तर्जीवविष | 50EU/मिलीग्राम से कम या उसके बराबर |
| अमीनो एसिड संरचना विश्लेषण | ±10% से कम या उसके बराबर |
| दिखावे | सफेद पाउडर |
आलिंद नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड चूहामुख्य रूप से एट्रियल मायोसाइट्स द्वारा स्रावित होता है, मस्तिष्क नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड मुख्य रूप से वेंट्रिकुलर मायोसाइट्स द्वारा स्रावित होता है, और सी - प्रकार का नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड मुख्य रूप से संवहनी एंडोथेलियल कोशिकाओं द्वारा स्रावित होता है और स्थानीय स्तर पर वासोडिलेटरी और एंटीप्रोलिफेरेटिव प्रभाव डालता है। प्लाज़्मा कार्डियक नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड में वासोडिलेशन, ड्यूरिसिस और न्यूरोएंडोक्राइन हार्मोन के विरोध के कई प्रभाव होते हैं।
चूंकि एवीपी रिलीज के लिए आलिंद फैलाव मुख्य ट्रिगर है, एएनपी की एकाग्रता बाएं आलिंद दबाव और फुफ्फुसीय धमनी सिस्टोलिक दबाव से निकटता से संबंधित है।
ऊपर उठाया हुआ: आवश्यक उच्च रक्तचाप, कोरोनरी धमनी रोग, हृदय विफलता, सुप्रावेंट्रिकुलर टैचीकार्डिया, समय से पहले सिरोसिस, ब्रोन्कियल अस्थमा, क्रोनिक ऑब्सट्रक्टिव पल्मोनरी डिजीज, एल्डोस्टेरोनिज्म और गुर्दे की बीमारी में देखा जाता है। तीव्र रोधगलन में, बढ़े हुए एएनपी में एलवी डिसफंक्शन और एएमआई में मृत्यु दर के लिए एक अद्वितीय पूर्वानुमान मूल्य होता है, और सबस्यूट चरण में तीव्र रोधगलन वाले रोगियों में एएनपी की बढ़ी हुई सांद्रता एक खराब दीर्घकालिक पूर्वानुमान का सुझाव देती है।
में कमी: हाइपरथायरायडिज्म, एट्रियल फाइब्रिलेशन में देखा जाता है।
सावधानियां
नमूना संग्रह यथासंभव समान परिस्थितियों में किया जाना चाहिए, उदाहरण के लिए, हर दिन एक ही समय पर, लेटने के बाद और 15 मिनट तक स्थिर रहने के बाद, तुलनीय परिणाम प्राप्त करने के लिए। अत्यधिक गतिविधि और टैचीकार्डिया से एएनपी बढ़ जाएगा। लिवर और किडनी की बीमारी को बाहर रखा जाना चाहिए, जहां एएनपी प्रतिधारण के कारण जमा हो सकता है।
आलिंद नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड चूहाएक पेप्टाइड हार्मोन है जो हृदय द्वारा संश्लेषित होता है जब वेंट्रिकुलर दीवार फैली हुई या तनावग्रस्त होती है। यह शरीर के तरल पदार्थ, शरीर में सोडियम संतुलन, रक्तचाप के नियमन में एक महत्वपूर्ण हार्मोन है और हृदय की रक्षा में भी भूमिका निभा सकता है। जब वेंट्रिकुलर दीवार को फैलाया या फैलाया जाता है, तो कार्डियक नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड रक्तप्रवाह में छोड़ा जाता है, जो बदले में हृदय के कार्य को बनाए रखने और रक्त वाहिकाओं को फैलाने का प्रभाव डालता है। यदि कार्डियक नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड का स्तर बढ़ता है, तो इससे हृदय पर भार बढ़ सकता है, जिससे हृदय विफलता हो सकती है।
आलिंद प्राकृतिक पेप्टाइड चूहे की मुख्य प्रभावकारिता
धमनियों और शिराओं का संतुलित फैलाव, हृदय पर आगे और पीछे के भार को कम करना, सांस की तकलीफ में तेजी से राहत।
01
मध्यम मूत्राधिक्य और सोडियम उत्सर्जन, परिसंचारी मात्रा भार को कम करना, वृक्क निस्पंदन डिग्री को बढ़ाना।
02
न्यूरोएंडोक्राइन सिस्टम के सक्रियण से उत्पन्न कार्डियोटॉक्सिसिटी को व्यापक रूप से रोकता है।
03
कार्डियक रीमॉडलिंग में देरी करें, मायोकार्डियल हाइपरप्लासिया, हाइपरट्रॉफी और इंटरस्टिशियल फाइब्रोसिस को रोकें, और दीर्घकालिक रुग्णता को कम करें।
04
कोई सकारात्मक इनोट्रोपिक और सकारात्मक हृदय गति प्रभाव नहीं, मायोकार्डियल ऑक्सीजन की खपत में कोई वृद्धि नहीं।
05
आलिंद नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड चूहाएक महत्वपूर्ण पेप्टाइड हार्मोन है जो द्रव संतुलन और रक्तचाप को विनियमित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। निम्नलिखित एक सामान्य संश्लेषण विधि है।
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संश्लेषण चरण
आमतौर पर, एट्रियल नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड को ठोस {{0} चरण संश्लेषण (ठोस - चरण संश्लेषण) या तरल {{2} चरण संश्लेषण (समाधान - चरण संश्लेषण) द्वारा संश्लेषित किया जा सकता है। ठोस चरण संश्लेषण में, पेप्टाइड श्रृंखला का निर्माण वाहक में धीरे-धीरे अमीनो एसिड जोड़कर किया जाता है।
एएनपी का अनुक्रम अपेक्षाकृत छोटा और ज्ञात है, जिसमें आमतौर पर 28 अमीनो एसिड अवशेष होते हैं।
संश्लेषण के दौरान, प्रत्येक अमीनो एसिड को प्रतिकूल प्रतिक्रियाओं से बचने के लिए उपयुक्त सुरक्षा समूहों की आवश्यकता होती है। संश्लेषण पूरा होने के बाद अमीनो एसिड को पेप्टाइड श्रृंखला से जोड़ने की अनुमति देने के लिए इन सुरक्षा समूहों को हटाने की आवश्यकता होती है।
पेप्टाइड श्रृंखला को चयनित संश्लेषण विधि और उपकरण के अनुसार एएनपी अनुक्रम के क्रम में चरण दर चरण संश्लेषित किया जाता है। प्रत्येक अमीनो एसिड संयोजन के लिए सुरक्षा, युग्मन और डिप्रोटेक्शन के बार-बार चरणों की आवश्यकता होती है।
संश्लेषण पूरा होने के बाद, उत्पाद की शुद्धता और सही संरचना सुनिश्चित करने के लिए पेप्टाइड को शुद्ध और चिह्नित करने की आवश्यकता होती है।
आणविक संरचना: पेप्टाइड श्रृंखलाओं की संरचना और संशोधन
Aपरीक्षण नैट्रियूरेटिक पेप्टाइडचूहाचूहे की आलिंद कोशिकाओं द्वारा संश्लेषित एक पॉलीपेप्टाइड हार्मोन है और नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड परिवार से संबंधित है। यह संरचना में मानव एट्रियल नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (एचएएनपी) के समान है लेकिन प्रजातियों में अंतर है। इसके शारीरिक कार्यों और संभावित अनुप्रयोगों को समझने के लिए इसके रासायनिक गुणों का अध्ययन बहुत महत्वपूर्ण है। निम्नलिखित विश्लेषण चार आयामों से किया जाता है: आणविक संरचना, भौतिक रासायनिक गुण, रिसेप्टर बाइंडिंग और जैविक गतिविधि।
भौतिक और रासायनिक गुण: घुलनशीलता और स्थिरता -rANP पानी और शारीरिक खारेपन में अत्यधिक घुलनशील है, जिसकी घुलनशीलता 10 mg/mL से अधिक है। इसकी घुलनशीलता पीएच से काफी प्रभावित होती है: अम्लीय स्थितियों (पीएच <5) में, आरएएनपी में प्रोटोनेशन के कारण घुलनशीलता में कमी का अनुभव हो सकता है; क्षारीय स्थितियों (पीएच > 9) में, डाइसल्फ़ाइड बंधन टूट सकते हैं, जिससे पॉलीपेप्टाइड श्रृंखला का डीपोलाइमरीकरण हो सकता है। इसलिए, आरएएनपी के भंडारण और उपयोग के लिए पीएच रेंज (आमतौर पर पीएच 6.0 - 8.0) के सख्त नियंत्रण की आवश्यकता होती है। आरएएनपी तापमान के प्रति संवेदनशील होता है। -20 डिग्री पर प्रशीतन में संग्रहित करने पर इसकी सक्रियता कई वर्षों तक बनी रह सकती है।
हालाँकि, 4 डिग्री पर, गतिविधि हर हफ्ते 5% से 10% तक कम हो सकती है; कमरे के तापमान (25 डिग्री) पर, 24 घंटों के भीतर गतिविधि हानि 30% से अधिक हो सकती है।
इसके अलावा, बार-बार जमने और पिघलने से आरएएनपी एकत्र हो सकता है और अघुलनशील अवक्षेप बन सकता है। इसलिए, इसे विभाज्य करने और इसे केवल एक बार उपयोग करने की अनुशंसा की जाती है।
आरएएनपी प्रोटीज़ (जैसे ट्रिप्सिन और काइमोट्रिप्सिन) के प्रति अत्यधिक संवेदनशील है। 0.1% ट्रिप्सिन युक्त घोल में, आरएएनपी को 37 डिग्री पर 30 मिनट के भीतर पूरी तरह से विघटित किया जा सकता है। इसलिए, प्रायोगिक या नैदानिक अनुप्रयोगों में, सुरक्षा के लिए प्रोटीज़ के साथ सह-अस्तित्व से बचना या प्रोटीज़ अवरोधक (जैसे पीएमएसएफ) जोड़ना आवश्यक है।
अनुप्रयोग और चुनौतियाँ
आरएएनपी के रासायनिक गुण इसे उच्च रक्तचाप, हृदय विफलता और गुर्दे की बीमारियों के इलाज के लिए संभावित बनाते हैं। हालाँकि, इसकी प्रजाति विशिष्टता (मानव रिसेप्टर्स पर कम गतिविधि), अल्प आधा जीवन (लगभग 5 - 10 मिनट), और प्रोटीनेज़ संवेदनशीलता इसके नैदानिक अनुप्रयोग को सीमित करती है। वर्तमान में, शोधकर्ता निम्नलिखित रणनीतियों के माध्यम से आरएएनपी को अनुकूलित कर रहे हैं: एनपीआर विकसित करें (जैसे आरएएनपी (आरईए 18)), एनपीआर द्वारा मध्यस्थता निकासी को कम करने के लिए एनपीआर (जैसे पेगाइलेशन) को कम करने के लिए आधा जीवन बढ़ाने के लिए; स्थिरता बढ़ाने के लिए नैनोकैरियर डिलीवरी।
रिसेप्टर बाइंडिंग: एनपीआर की दोहरी भूमिका {{0} ए और एनपीआर - सी
आरएएनपी दो झिल्ली रिसेप्टर्स के माध्यम से अपना प्रभाव डालता है:
एनपीआर-ए (नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड रिसेप्टर-ए)
आरएएनपी की एनपीआर -ए से बंधनकारी आत्मीयता उच्च (केडी ≈ 1-10 एनएम) है, जो रिसेप्टर के इंट्रासेल्युलर खंड में गनीलेट साइक्लेज़ गतिविधि को सक्रिय करती है और जीटीपी से सीजीएमपी के गठन को उत्प्रेरित करती है। सीजीएमपी दूसरे संदेशवाहक के रूप में कार्य करता है, जो प्रोटीन किनेज जी (पीकेजी) के सक्रियण के माध्यम से आयन चैनलों (जैसे कि गुर्दे की ट्यूबलर उपकला कोशिकाओं में Na⁺ चैनल) और एंजाइम गतिविधियों (जैसे फॉस्फोडिएस्टरेज़) को विनियमित करता है, अंततः सोडियम उत्सर्जन, ड्यूरिसिस और वासोडिलेशन को बढ़ावा देता है।
अध्ययनों से पता चला है कि चूहे एनपीआर पर आरएएनपी की सक्रियण दक्षता एचएएनपी की 1.2-1.5 गुना है।
एनपीआर-सी (नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड रिसेप्टर-सी)
एनपीआर -सी में कोई एंजाइमेटिक गतिविधि नहीं है और मुख्य रूप से क्लीयरेंस के लिए रिसेप्टर के रूप में कार्य करता है, एंडोसाइटोसिस के माध्यम से आरएएनपी को कम करता है। आरएएनपी को एनपीआर-सी से बांधने से इंट्रासेल्युलर सिग्नल ट्रांसडक्शन (जैसे कि एडिनाइलेट साइक्लेज का अवरोध) शुरू हो सकता है, लेकिन यह प्रभाव एनपीआर{{3}ए) की तुलना में कमजोर है।
आरएएनपी के आनुवंशिक रूप से इंजीनियर किए गए वेरिएंट (जैसे कि आरएएनपी(जी16आर, ए17ई, क्यू18ए)) के माध्यम से, एनपीआर-सी की बाइंडिंग क्षमता लगभग 200 गुना कम हो जाती है, जबकि एनपीआर पर सक्रियण क्षमता बरकरार रहती है।
जैविक गतिविधि: वासोडिलेशन और सोडियम उत्सर्जन और मूत्राधिक्य
आरएएनपी की जैविक गतिविधि मुख्य रूप से सीजीएमपी मार्ग के माध्यम से प्राप्त की जाती है:
वाहिकाप्रसरण
rANP चूहों की महाधमनी, वृक्क धमनी और मेसेंटेरिक धमनी को लगभग 0.1 - 1 nM के EC50 के साथ फैला सकता है। इसके तंत्र में शामिल हैं:
संवहनी चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं की सीधी छूट;
एंडोटिलिन-1 (ईटी-1) द्वारा प्रेरित संवहनी संकुचन का निषेध;
संवहनी चिकनी मांसपेशी कोशिका प्रसार में कमी (एंडोटिलिन जीन अभिव्यक्ति को बाधित करने के लिए GATA4-निर्भर मार्ग के माध्यम से)।
Na-कमी और मूत्राधिक्य
आरएएनपी (0.325 यूजी/मिनट) का अंतःशिरा इंजेक्शन चूहे के मूत्र में सोडियम उत्सर्जन को 3 - 5 गुना और मूत्र की मात्रा को 2 - 3 गुना तक बढ़ा सकता है। इसकी कार्रवाई साइटों में शामिल हैं:
ग्लोमेरुलस: अभिवाही धमनी को फैलाकर, यह गुर्दे के रक्त प्रवाह को बढ़ाता है;
नेफ्रॉन: Na⁺-K⁺-2Cl⁻ सह-ट्रांसपोर्टर (NKCC2) और Na⁺/H⁺ एक्सचेंजर (NHE3) को रोकना, Na⁺ पुनर्अवशोषण को कम करना;
संग्रहण वाहिनी: एक्वापोरिन 2 (AQP2) की अभिव्यक्ति को रोकना, पानी के पुनर्अवशोषण को कम करना।
रक्तचाप का नियमन
rANP चूहों के औसत धमनी दबाव को 10 - 20 mmHg तक कम कर सकता है, जिसका प्रभाव 30 - 60 मिनट तक रहता है। इसका एंटीहाइपरटेंसिव प्रभाव सहक्रियात्मक रूप से वासोडिलेशन और सोडियम कमी से संबंधित है, और हृदय गति में परिवर्तन पर निर्भर नहीं है।
चूहे आलिंद नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (आरएएनपी) के रासायनिक गुण पॉलीपेप्टाइड हार्मोन की विशिष्ट विशेषताओं को दर्शाते हैं: संरचना {{0}निर्भर गतिविधि, पर्यावरणीय संवेदनशीलता, और रिसेप्टर-मध्यस्थता संकेत पारगमन। इसके भौतिक रासायनिक गुणों और जैविक प्रभावों की गहरी समझ न केवल बुनियादी अनुसंधान के लिए उपकरण प्रदान करती है बल्कि नई हृदय संबंधी दवाओं के विकास का रास्ता भी बताती है।
अक्सर पूछे जाने वाले प्रश्न
एट्रियल - नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (चूहा) एक 28 {{2} एमिनो-एसिड पेप्टाइड हार्मोन है जो नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड परिवार से संबंधित चूहों के एट्रियल मायोसाइट्स द्वारा अंतर्जात रूप से निर्मित और स्रावित होता है। इसमें 7वें और 23वें अमीनो एसिड अवशेषों के बीच एक डाइसल्फ़ाइड बंधन द्वारा गठित एक विशिष्ट चक्रीय संरचना है, जो इसकी जैविक गतिविधि को बनाए रखने के लिए आवश्यक है। लगभग 3080 Da के आणविक भार और उच्च संरचनात्मक विशिष्टता के साथ, यह चूहे के मॉडल में हृदय और गुर्दे के शारीरिक विनियमन पर प्रीक्लिनिकल अनुसंधान के लिए एक महत्वपूर्ण उपकरण है।
एट्रियल {{0} नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (चूहा) विशिष्ट नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड रिसेप्टर्स (एनपीआर {{1} ए, एनपीआर - बी, एनपीआर - सी) से जुड़कर चूहों के हृदय और गुर्दे की प्रणालियों को विनियमित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। इसके मुख्य कार्यों में नैट्रियूरेसिस (सोडियम उत्सर्जन) और ड्यूरेसिस को बढ़ावा देना, रक्तचाप को कम करने के लिए परिधीय रक्त वाहिकाओं को फैलाना, प्लाज्मा मात्रा और हृदय भार को विनियमित करना और शरीर के तरल पदार्थ और इलेक्ट्रोलाइट संतुलन को बनाए रखने के लिए रेनिन {{5}एंजियोटेंसिन{{6}एल्डोस्टेरोन सिस्टम (आरएएएस) को रोकना शामिल है। ये कार्य इसे चूहे के प्रीक्लिनिकल प्रयोगों में उच्च रक्तचाप, हृदय विफलता और गुर्दे की शिथिलता के अध्ययन में व्यापक रूप से उपयोग करते हैं।
एट्रियल -नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (चूहा) का उपयोग आमतौर पर चूहों से जुड़े विवो और इन विट्रो प्रीक्लिनिकल अध्ययन दोनों में किया जाता है। विवो प्रयोगों में, चूहे के हेमोडायनामिक्स, गुर्दे के कार्य और हार्मोन स्राव पर इसके प्रभावों का निरीक्षण करने के लिए इसे आमतौर पर अंतःशिरा जलसेक, चमड़े के नीचे इंजेक्शन, या इंट्रापेरिटोनियल इंजेक्शन के माध्यम से प्रशासित किया जाता है। इन विट्रो अध्ययन के लिए, इसके आणविक तंत्र, जैसे रिसेप्टर सक्रियण, सिग्नल ट्रांसडक्शन पथ और सेल फ़ंक्शन पर नियामक प्रभाव का पता लगाने के लिए इसे सेल कल्चर सिस्टम (उदाहरण के लिए, चूहे कार्डियोमायोसाइट्स, रीनल ट्यूबलर एपिथेलियल कोशिकाएं) में जोड़ा जाता है।
एट्रियल -नैट्रियूरेटिक पेप्टाइड (चूहे) को आम तौर पर 98% से अधिक या उसके बराबर (एचपीएलसी द्वारा निर्धारित) की शुद्धता के साथ एक सफेद लियोफिलिज्ड पाउडर के रूप में आपूर्ति की जाती है, जो पानी और सामान्य खारा में आसानी से घुलनशील है लेकिन कार्बनिक सॉल्वैंट्स में अस्थिर है। यह तापमान, प्रोटीज और पीएच परिवर्तन के प्रति संवेदनशील है; इस प्रकार, गिरावट को रोकने के लिए इसे -20 डिग्री या उससे कम तापमान पर एक सीलबंद, अंधेरे कंटेनर में संग्रहित किया जाना चाहिए। पुनर्गठित समाधानों का तुरंत उपयोग किया जाना चाहिए या 2-8 डिग्री पर 72 घंटे से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाना चाहिए। इसके अतिरिक्त, विश्वसनीय परिणाम सुनिश्चित करने के लिए प्रयोगों में इसकी खुराक को चूहे के तनाव, उम्र और प्रयोगात्मक उद्देश्यों के अनुसार समायोजित किया जाना चाहिए।
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